Justering av avbildningssystem för optisk väg i ljusmikroskop och kontur av mikroskopisk undersökning
Justering av optiskt bildvägssystem och mikroskopisk undersökningskontur
Justering av det avbildande optiska systemet i ett mikroskop utförs enligt behoven hos olika mikroskopitekniker. Den så kallade mikroskopin, i ett nötskal, är den belysningsmetod som används när man observerar ett prov genom ett mikroskop, och tekniken och metoden för att få bättre kontrast i bilden som provet bildar. Följande beskriver kortfattat mikroskopin har mognat i flera metoder och motsvarande justering av optiska system för mikroskopavbildning.
1. Sändningsljusfält:
Detta är den mest traditionella och vanliga appliceringsmetoden sedan mikroskopets uppfinning. Grundläggande komponenter: a. Objektivlins: vilken objektivlins som helst kan användas för observation av ljusa fält; b. Spotting scope: alla typer av spotting scope kan användas, helst utrustade med öppningsbländare. Justeringsmetod: Efter att ovanstående mikroskops Kuhler-belysningssystem har justerats, kan ljusfältsmetoden tillämpas. Användningsområde: alla färgade vävnadssnitt, blodutstryk etc. Försiktighetsåtgärder: a. När man använder ljusfältsmetoden för observation måste Kuhlers belysningssystem justeras; b. Synfältets membran bör inte öppnas godtyckligt, och kondensorspegelns främre lins ska placeras ut och in i den optiska banan respektive när objektivlinser på 10×, mindre än 10× och mer än 10 används. ×; c. Kondensatorspegelns bländarbländare bör inte användas för att justera ljusstyrkan i synfältet, och höjden på kondensorspegeln bör inte justeras urskillningslöst, annars kommer upplösningen på mikroskopet att sänkas och upplösningen på den färgade vävnaden kommer att skadas. mikroskopets upplösning och skadan har justerats till Kuhlers belysningssystem; d. för mikrofotografier, varje förändring i användningen av en förstoring av objektivlinsen, måste du justera bländarbländaren på kondensorlinsen, så att dess storlek är exakt lika med den numeriska bländaren som används i objektivlinsen på 2/3.
2. Kontrastmetod för transmitterad ljusfas:
Detta är en modern mikroskopundersökning av en kontrastförstärkningsmetod. Grundkomponenter: faskontrastobjektiv, ljust synfält och faskontrast multifunktionskikare, fokusteleskop, gröna filter.
Justeringsmetoder:
a. Baserat på justeringen av Kuhlers belysningssystem, fokusera provet tydligt med ljusfältsmetoden
b. Vrid spottingskopet till Ph1 för att justera urtavlans skala, välj 10 × faskontrastobjektiv och byt ut det genomskinliga provet som ska observeras.
c. Koppla ur ett av okularen, ersätt det med ett centrerat teleskop och fokusera på de två faskontrastringarna i synfältet (den svarta faskontrastringen på objektivlinsen och ljustransmissionens faskontrastring på kondensorlinsen).
d. De två faskontrastringarna i synfältet kanske inte nödvändigtvis sammanfaller, justera de två justeringsanordningarna på spottingskopet (justera vänster och höger positioner för justeringsspaken för faskontrastringen och justera de främre och bakre positionerna på friktionsratten) , så att ljusöverföringsringen för framsidan och baksidan till höger och vänster sammanfaller med den svarta ringen
e. Efter justering, byt tillbaka till okularet för observation och tryck in det gröna filtret i den optiska banan för att observera faskontrastbilden av provet.
f. När det finns 20× och 40× objektiv för observation ska spotting-linsen ställas in på Ph2-positionen, och när du använder 100-objektiv, ska spotting-linsen ställas in på Ph3-positionen.
Användningsområde: Det är lämpligt för att observera transparenta, ofärgade eller ofärgade prover, såsom alla typer av celler, levande vävnader, ofärgade eller ofärgade vävnadssektioner, vattenlevande organismer och så vidare.
3. Metod för differentiell interferensfaskontrast:
För att övervinna faskontrastmetoden för observation av provdetaljerna runt bilden tillsammans med en halo, kommer att maskera de detaljer som borde ha setts, liksom prover eller vävnadssnitt kräver en ganska tunn tjocklek, i princip kan vara tjockare än 10?m och andra begränsningar, användningen av principen om dubbelstråleinterferens för att designa metoden för sub-differentiell interferensfaskontrast.
Justeringsmetoder:
a. DIC-metoden måste justeras utifrån att Kulemin-systemet redan har justerats
b. Använd en 10× objektivlins och bestäm fokuseringspositionen för objektivlinsen som kan se provet tydligt med ett ljust synfält.
c. Placera polarisatorn i belysningsbanan och notera att den ska vara orienterad i öst-västlig riktning.
d. Vrid kondensorratten till det läge som motsvarar användningen av 10 × objektivlinsen, dvs. DIC 0.3-0.4.
e. Sätt in DIC-reglaget för 10× objektivlinsen på baksidan av objektivlinsen eller på objektivomvandlaren.
f. Sätt in analysatorn i den optiska bildbanan och notera att dess orientering ska vara syd-nord.
g. Byt ut det genomskinliga provet som ska observeras, slå på ljuskällan för att fokusera provet tydligt.
h. Justera DIC-insatsen så att den differentiella interferenskontrastbilden för att uppnå bästa effekt, det vill säga den mest uppenbara reliefeffekten.
i. Justera samtidigt bländarbländaren på kondensorspegeln, så att effekten av kontrasten också blir optimal.
j. Finjustera sedan detaljerna i provet för att se strukturen på provet på olika nivåer.
k. Om komplementfärgen (första ordningens röd retardationsplatta) sätts in och DIC-insatsen justeras samtidigt, kan de ständigt föränderliga lysande färgerna ses i synfältet, med rött, orange, gult, grönt, blått, lila, rosa, rosa-violett och guld-gul. Användningsområde: transparenta eller ofärgade vävnadssektioner, tjocklek upp till ca 100?m, levande vävnad och levande celler i kultur, små levande organismer och så vidare.
