Fördelar och nackdelar med laserskanningsmikroskopi
Fördelarna är följande:
1. Exciterad av rött eller infrarött ljus är ljusspridningen liten (spridningen av små partiklar är omvänt proportionell mot våglängdens fjärde potens).
2. Inget behov av nålhål, kan samla in fler spridda fotoner från avbildningstvärsnittet.
3. Pinholes kan inte särskilja spridda fotoner som emitteras från defokuserade eller fokala områden, och multifotoner har bättre signal-brusförhållande vid djup bildbehandling.
4. Det ultravioletta eller synliga ljuset som används för excitation av en enskild foton absorberas lätt och dämpas av provet innan strålen når fokalplanet, vilket gör det svårt att excitera djupa lager.
5. När det gäller observation av biologisk mikroskopi är det första övervägandet att inte skada det aktiva tillståndet hos själva organismen och att upprätthålla cirkulationen av vatten, jonkoncentration, syre och näringsämnen. När det gäller ljusobservation måste både termisk energi och fotonenergi förbli inom bestrålningsdosen och ljusenergin som inte skadar cellerna.
6. Multifotonmikroskopi har också många fördelar. När det gäller tredimensionell upplösning, djupinvasion, spridningseffektivitet, bakgrundsljus, signal-brusförhållande, kontroll, etc., har lasermikroskop oöverträffade eller överlägsna egenskaper som tidigare lasermikroskop inte hade.
Multifoton konfokal laserskanningsmikroskopi har utvidgats till olika forsknings- och tillämpningsområden, den kan utföra tredimensionell icke-förstörande observation på prover i deras naturliga tillstånd och förbättra systemets upplösning och signal-brusförhållande. Genom att utnyttja förändringarna i materialegenskaper efter multifotonexcitation kan den också uppnå tredimensionell höjddatalagring och tredimensionell mikrobearbetning i vilken riktning som helst, vilket har högt tillämpningsvärde. Det kan tros att med vidareutvecklingen av mekaniska material , och laserteknologier relaterade till multifoton konfokal mikroskopi, kommer multifoton konfokal laserskanningsmikroskopi att ha större utveckling och bredare tillämpningar
Nackdelarna är följande:
1. Endast för fluorescensavbildning.
2. Om provet innehåller kromoforer som kan absorbera excitationsljus, såsom pigment, kan provet utsättas för termisk skada.
3. Upplösningen är något reducerad, även om den kan förbättras genom att samtidigt använda konfokala små hål, blir det signalförlust.
4. På grund av begränsningarna hos dyra ultrasnabba lasrar är kostnaden för multifotonskanningsmikroskop relativt hög.
