Biologisk mikroskopi på volymen av vävnadsblock
Biomikroskopi Hittills är iskall fixering, frusna ultratunna snitt och frusen torr manipulation rutinmetoder för röntgenmikrofält av vävnader och celler. Detaljerna i metoden förklaras i följande punkter:
Biologiska mikroskop Mikroskop med kondensorlins kan flyttas upp och ner för att uppnå en måttlig ljusstyrka, eller så kan bländaren på den variabla ljusexpandern ändras för att uppnå en måttlig ljusstyrka på 9b. Om ljuset är soligt kan spotting scope höjas på lämpligt sätt och bländaren på det variabla ljuset kan förstoras på lämpligt sätt. Om ljuset är för starkt, så kan strålkastarspegeln vara lämplig nedåt, bländaren för det variabla ljussprånget för lämplig minskning. Om det i det här fallet fortfarande känns bländande, kan du välja lämpligt filter placerat i fästet under strålkastaren. Detta kan erhållas för att göra dig nöjd med ljusstyrkan. Naturligtvis, i justeringen av de övre och nedre positionerna av kondensorlinsen kan variera storleken på bländaröppningen för ljusavläsningen och valet av lämpliga filter, det vill säga efter en viss period av övning och erfarenhet.
Biologiskt mikroskop En mycket viktig fråga är i processen med provtagning och separation av celler, frystorkning och hartsinbäddning (FD) efter frysning av ultrahäften, frystorkning efter finkörning av varje del av innehållet i 65 elementär sammansättning måste vara hanteras mycket försiktigt och får inte skada de celler som ska observeras och analyseras. Eftersom röntgenmikroområdesanalysen inte bara är en massa steg, och kostnaden är mycket hög, om de analyserade cellerna efter en lång tid och flera steg av bearbetning är skadade celler eller döda celler, för att dra fel slutsatser är mycket beklagligt. Till exempel har kardiomyocyterna som isolerats genom kollagenasbehandlingen två morfologier, den ena är lång stavformad och den andra är rund. De senare är döende celler som skadades under cellisolering.
Biomikroskopi Innehållet och fördelningen av elektrolyter i dessa två typer av celler är mycket olika. Na var mycket högt och K mycket lågt i de runda kardiomyocyterna, och koncentrationen av ca var mycket hög i mitokondrierna. Efter kontroll med andra analysmetoder visade det sig att det höga Na och det låga K i de runda cellerna och det höga ca i mitokondrierna var resultatet av skada på cellmembranet under cellseparationen. Kallfixering av celler och vävnader görs ofta genom släckningsfixering följt av konservering i flytande kväve. Släckfixering är viktig för effektiviteten av konserveringen. Levande celler eller färska vävnader är rika på vatten, när släckning är ofta cellerna eller vävnaderna och kylmedlet (särskilt med flytande kväve ren kyla) direktkontakt med delarna av den första frysfixeringen, vilket bildar ett "skal", vilket förhindrar kylfixering i mitten av cellen. Som ett resultat hittas iskristaller ofta i mitten av större celler under mikrocellulär röntgenanalys. För att förhindra att detta inträffar används ämnen med en smältpunkt högre än flytande kväve men lägre än 806c torrt som kylmedel. Det finns många sådana ämnen, men * lätt att erhålla, billigt är koncentrerad propan (kokpunkt på 42.120c, smältpunkt på 187.10c, molekylvikt på 44.1), kylningshastigheten * snabb. Det har dock nackdelen att det är brandfarligt.
Biologiskt mikroskop kan placeras på en speciell hylla muskelfiber, så att muskelfiberkontraktionen för att nå en viss tidsfas måste fixeras, starta omedelbart munstycket, så att den flytande propanen till muskelfiberstrålen, så att släckningen av kylan fixad. Därefter tas muskelfibern ut tillsammans med stativet och läggs i flytande kväve. Om fixering av blodceller eller isolerade celler, första låghastighetscentrifugering för att göra cellerna koncentrerade, kommer cellerna att överföras till en god värmeledningsförmåga av silverröret, röret i den flytande propankroppen kall fixerad. Halllaboratoriet fixerade råttbukspottkörteln, de två första stålstyckena med flytande helium (eller flytande kväve) förkylning, med en klämma fastklämd kommer de två kopparbitarna att placeras framför och bakom bukspottkörteln, så att fastern till körtelsläckande kallfixering. Vävnader eller celler kan lagras i flytande kväve under lång tid efter släckning och fixering.
