Felsökningsmetoder och steg för faskontrastmikroskopi
a. På basis av justering av Kuhlers belysningssystem, använd ljusfältsmetoden för att fokusera provet tydligt;
b. Vrid strålkastaren till Ph1 och rikta in den mot skallinjen på skivspelaren. Välj ett 10 x faskontrastobjektiv och ersätt det med det genomskinliga provet som ska observeras;
c. Ta bort ett av okularen, ersätt det med ett centreringsteleskop och fokusera på de två kontrastringarna i synfältet (den svarta kontrastringen på objektivlinsen och transmittanskontrastringen på kondensorlinsen);
d. De två skillnadsringarna i synfältet kanske inte nödvändigtvis sammanfaller. Justera de två justeringsanordningarna på strålkastaren (justera vänster och höger läge för skillnadsringarna med justeringsstänger och friktionsknappar för justering av främre och bakre lägen), så att den genomskinliga ringen rör sig fram och tillbaka för att sammanfalla med den svarta ringen ;
e. Efter justering, växla tillbaka till observationsokularet och tryck in det gröna filtret i den optiska banan för att observera fasskillnadsbilden för provet;
f. Vid observation med 20 x och 40 x objektiv ska strålkastaren ställas in i position Ph2, och när du använder en 100 x objektiv ska strålkastaren ställas in i position Ph3.
Användningsomfång: Lämplig för att observera transparenta, ofärgade eller ofärgade prover, såsom olika celler, levande vävnader, ofärgade eller ofärgade vävnadsskivor, vattenlevande organismer, etc.
Grundprincipen för faskontrastmikroskop
När ljus passerar genom ett relativt genomskinligt prov, sker ingen signifikant förändring i ljusets våglängd (färg) och amplitud (ljusstyrka). Därför, när man observerar ofärgade prover (som levande celler) under ett vanligt optiskt mikroskop, är deras morfologi och inre struktur ofta svåra att särskilja. Men på grund av skillnaderna i brytningsindex och tjocklek hos olika delar av cellen, kommer det att finnas skillnader i den optiska vägen för direkt och diffrakterat ljus när det passerar genom detta prov. När den optiska vägen ökar eller minskar kommer fasen för accelererande eller eftersläpande ljusvågor att ändras (vilket resulterar i fasskillnad). Fasskillnaden i ljus kan inte kännas med blotta ögat, men fasskillnadsmikroskopet kan använda sin speciella anordning - en cirkulär bländare och en fasplatta, och använda interferensfenomenet ljus för att omvandla ljusets fasskillnad till en amplitudskillnad (ljus och mörk skillnad) som kan upptäckas av det mänskliga ögat. Detta gör att det ursprungligen genomskinliga föremålet visar uppenbara skillnader i ljus och mörker, ökar kontrasten och gör att vi tydligt kan observera levande celler och vissa fina strukturer inuti celler som inte kan ses eller tydligt ses under vanliga optiska mikroskop och mörkfältsmikroskop.
Avbildningsprincipen för ett faskontrastmikroskop: Den optiska källan kan bara passera genom en transparent ring med en cirkulär öppning, som sedan fokuseras till en ljusstråle. När denna ljusstråle passerar genom föremålet som testas, genomgår den olika grader av avvikelse (diffraktion) på grund av de olika optiska banorna för varje del. På grund av det faktum att bilden som bildas av den transparenta ringen sammanfaller med den konjugerade ytan på fasplattan och fokalplanet bakom objektivlinsen. Därför passerar direkt ljus som inte har avvikit genom konjugatytan, medan diffrakterat ljus som har avvikit passerar genom den kompenserande ytan. På grund av de olika egenskaperna hos konjugatytan och kompensationsytan på fasplattan kommer de att generera en viss fasskillnad respektive intensitetsminskning av ljuset som passerar genom dessa två delar. De två uppsättningarna av ljus kommer sedan att konvergera genom den bakre linsen och färdas på samma optiska väg, vilket orsakar interferens mellan direkt och diffrakterat ljus, vilket ändrar fasskillnaden till amplitudskillnad. På detta sätt, under faskontrastmikroskopi, omvandlas den fasskillnad som inte kan urskiljas av det mänskliga ögat till en amplitudskillnad (ljusstyrkeskillnad) som kan urskiljas av det mänskliga ögat genom ljuset från en färglös transparent kropp.
