Bestämning av antalet mikroorganismer - mikroskopisk direkträkningsmetod!
Grundläggande
Mikroskopisk direkträkningsmetod är en enkel, snabb och intuitiv metod för att placera en liten mängd av suspensionen av provet som ska testas på en speciell glasskiva (även känd som en bakterieräknare) med en bestämd yta och volym, och räkna direkt under ett mikroskop. För närvarande är de vanligaste bakterieräknare hemma och utomlands: blodcellsräknare, Peteroff-Hauser bakterieräknare och Hawksley bakterieräknare, etc. De kan alla användas för att räkna suspensioner såsom jäst, bakterier och mögelsporer, och de grundläggande principerna är desamma. De två sistnämnda bakterieräknarna har en total volym på 0.02mm3 efter att ha täckts med ett täckglas, och avståndet mellan täckglaset och objektglaset är endast 0,02 mm, så små celler som t.ex. bakterier kan observeras och räknas med en oljesänkningsobjektiv. Förutom att använda dessa bakterieräknare finns det också en uppskattningsmetod för att direkt observera förhållandet mellan utstrykningsytan och synfältsytan under ett mikroskop. Denna metod används vanligtvis för bakteriologisk undersökning av mjölk. Fördelen med direkträkningsmetoden med mikroskop är att den är intuitiv, snabb och enkel att använda. Men nackdelen med denna metod är att de uppmätta resultaten vanligtvis är summan av döda och levande bakterier. För närvarande finns det några metoder för att övervinna denna brist, såsom att kombinera levande bakterier som färgar mikrokammarkultur (kort tid) och lägga till celldelningshämmare för att uppnå syftet att endast räkna levande bakterier.
I detta experiment användes en hemocytometer som ett exempel för att utföra direkt räkning under ett mikroskop. För användningsmetoderna för de andra två bakterieräknarna, se instruktionerna från respektive tillverkare. Direkträkning i mikroskop med hemocytometer är en vanlig mikrobiell räkningsmetod. Räknebrädan är en specialtillverkad glasrutschbana, på vilken fyra slitsar bildar tre plattformar; den bredare plattformen i mitten är uppdelad i två halvor av en kort horisontell slits, och varje sida av plattformen är fodrad med ett galler. Varje rutnät är uppdelat i nio stora rutor, och den mittersta stora kvadraten är räknekammaren. Räknerummets skala har i allmänhet två specifikationer, den ena är att en stor ruta är uppdelad i 25 mittersta rutor, och varje mellanruta är uppdelad i 16 små rutor; den andra är att en stor ruta är uppdelad i 16 mittersta rutor, och varje mittersta rutor är uppdelad i 25 små rutor, men oavsett vilken typ av räknebräda, finns det 400 små rutor i varje stor ruta. Sidans längd på varje stor kvadrat är 1 mm, och sedan är ytan på varje stor kvadrat 1 mm 2. Efter att täckglaset har täckts är höjden mellan täckglaset och glidglaset 0,1 mm, så volymen av räknekammaren är 0,1 mm (en tiotusendels milliliter).
