Skillnad mellan fluorescensmikroskop och vanligt optiskt mikroskop
Skillnaden mellan fluorescensmikroskop och vanligt optiskt mikroskop, fluorescensmikroskop och vanligt optiskt mikroskop är olika, det är inte genom belysningen av den vanliga ljuskällan att observera provet, utan användningen av en viss våglängd av ljus (vanligtvis ultraviolett, blåviolett) excitation av provet under mikroskopet inuti det fluorescerande materialet, så att det avger fluorescerande ljus, så fluorescensmikroskopets roll i ljuskällan är inte en direkt belysning, utan som en slags stimulering av prover av fluorescensen i det inre. källan till fluorescensmikroskopet är inte en direkt belysning, utan som en energikälla för att stimulera det fluorescerande ämnet inuti provet. Anledningen till att vi kan observera provet beror inte på belysningen av ljuskällan, utan det fluorescensfenomen som presenteras av det fluorescerande ämnet i provet efter att ha absorberat den exciterade ljusenergin. Det kan ses att egenskaperna hos fluorescensmikroskopet huvudsakligen är att dess ljuskälla kan tillhandahålla ett stort antal specifika våglängdsområde för excitationsljus, så att de fluorescerande ämnena i det undersökta provet kan erhålla den nödvändiga intensiteten av excitationsljus. Samtidigt måste fluorescensmikroskopet ha ett motsvarande filtersystem. Fluorescensmikroskopet är det grundläggande verktyget för **fluorescenshistokemi. Den består av ultrahögtrycksljuskälla, filtersystem (inklusive excitations- och undertryckningsfilterplatta), optiskt system och fotografiskt system och andra huvudkomponenter, är användningen av en viss våglängd av ljus för att stimulera provet att avge fluorescens.
1. sättet för fluorescensexcitation: enligt våglängdsområdet för ljus är uppdelat i UV-exciteringsmetod (med ultraviolett belysning) och BV-excitationsmetod (med blåviolett ljus) två typer av UV-excitationsmetoder är kortare än 400nm nära ultraviolett ljus för excitation. Det finns inget synligt excitationsljus i denna metod, så den observerade fluorescensen visar färgämnets inneboende fluorescens, och det är lätt att skilja den specifika fluorescensen på provet från självfluorescensen i bakgrundsvävnaden.
2. BV-exciteringsmetod: Metoden är centrerad på 404nm, 434nm från ultraviolett till blått ljus för excitation. Denna metod använder blått ljus för att bestråla provet, så cut-off-filtret i fluorescensobservationssystemet måste använda ett filter som helt kan blockera det blå ljuset och helt klara den önskade gröna och gula fluorescensen. Fluorescerande pigment för fluorescerande antikroppsmetoden. Eftersom våglängden för den maximala absorptionen av excitationsljuset och våglängden för den maximala emissionen av fluorescensen ligger nära varandra, måste filtren som används i BV-excitationsmetoden vara skarpa cut-off-filter. Denna metod använder blått ljus som excitationsljus, så absorptionseffektiviteten för fluorokromen är högre och en ljusare bild kan erhållas. Nackdelen är att fluorescens under 500 nm inte kan ses, och över 500 nm ser hela bilden gul ut. I metoden med fluorescerande antikroppar bedöms det mesta av specificiteten av färgen som är unik för fluorokromen, så nackdelarna med BV-excitationsmetoden som beskrivs ovan tenderar att vara extremt inflytelserik när man diskuterar subtil specificitet.
