Experimentella principer för mikrobiell mikroskopi direkträkningsmetod
Direkträkning i mikroskop med hjälp av en hemocytometer är en vanlig metod för att räkna mikroorganismer. Fördelen med denna metod är att den är intuitiv och snabb. Placera den lämpligt utspädda bakteriesuspensionen (eller sporsuspensionen) i räknekammaren mellan objektglaset och hemocytometerns täckglas och räkna under ett mikroskop. Eftersom volymen på räknekammaren är fixerad (0,1 mm2) kan den omvandlas till det totala antalet mikroorganismer per volymenhet baserat på antalet mikroorganismer som observerats under mikroskopet. Eftersom denna metod räknar det totala antalet levande och döda bakterier, kallas den också för totala bakterieräkningsmetoden.
En hemocytometer är vanligtvis en speciell bild med fyra slitsar som bildar tre plattformar. Mellanplattformen är uppdelad i två halvor av ett kort horisontellt spår. Det finns ett fyrkantigt rutnät ingraverat på plattformen på varje sida. Varje fyrkantsrutnät är uppdelat i nio stora rutor. Det stora torget i mitten är räknerummet. Räkningen av mikroorganismer sker i räknekammaren. Hemocytometerns struktur visas i figur Ⅷ-1.
Räknekammarens skala har i allmänhet två specifikationer. En är en stor kvadrat uppdelad i 16 medelstora rutor, och varje medelstor ruta är uppdelad i 25 små rutor (Figur Ⅷ-2); den andra är ett stort torg. Det kvadratiska rutnätet är uppdelat i 25 medelstora rutor, och varje medelstor ruta är uppdelad i 16 små rutor (Figur VIII-1, C). Men oavsett vilken typ av räknebräde det är, är antalet små rutor i varje stor ruta detsamma, det vill säga 16×25=400 små rutor, som visas i figur Ⅷ-2.
Sidlängden på varje stor kvadrat är 1 mm, så arean på varje stor kvadrat är 1 mm2. Efter att täckglaset har täckts är höjden mellan objektglaset och täckglaset 0,1 mm, så volymen på räknekammaren är 0,1 mm3.
När du räknar, räkna vanligtvis det totala antalet bakterier i fem medelstora rutor, hitta sedan medelvärdet för varje mittersta kvadrat och multiplicera sedan med 16 eller 25 för att få det totala antalet bakterier i en stor kvadrat, och beräkna sedan Konvertera till totalt antal bakterier i 1 ml bakterielösning.
