Fluorescensmikroskop använder metoder och försiktighetsåtgärder
Användningsmetod:
(1) Placera materialarket på bärarbordet.
(2) Slå på fluorescensmikroskopets spänningsregulator. Tryck sedan på startgruppen för att tända UV-lampan ska inte stängas av på 15 minuter och ska inte startas om på 3 minuter efter att den stängts av.
(3) Vrid excitationsfiltret till v, dikroisk film till v, välj 495 eller 475 nm blockeringsfilter.
(4) Välj uvFL40, uvFL100 fluorescensmottagande objektivlinsmikroskopi.
(5) Tillsätt icke-fluorescerande olja på objektglaset, först 40 x och sedan 100 x fokuseringsmikroskopi. Visa fluorescens.
(7) Eftersom det fluorescerande materialet genom ultraviolett bestrålning med tillväxten av fluorescens gradvis försvagas över tiden, så den mikroskopiska undersökningen bör ofta ändra synfältet.
(8) kan också använda uvFL10 eller uvFL20 mikroskopimaterial med låg förstoring (med låg förstoring utan att tillsätta icke-fluorescerande olja).
Fluorescensbildinspelningsmetod:
Fluorescensbild sedd med fluorescensmikroskop, den ena har morfologiska egenskaper, den andra är med fluorescensens färg och ljusstyrka, vid bedömning av resultaten måste de två kombineras med en omfattande bedömning. Resultaten registreras enligt subjektiva indikatorer, dvs genom visuell observation av arbetaren. Som en allmän kvalitativ observation, i grunden tillförlitlig. Med utvecklingen av teknik och vetenskap, i varierande grad, användning av objektiva indikatorer för att registrera resultaten av bedömningen, såsom användning av cellspektrofotometer, bildanalysator och andra instrument. Men de resultat som registreras av dessa instrument måste också kombineras med subjektivt omdöme.
Fluorescensmikroskopfotograferingsteknik är mycket nödvändig för att spela in fluorescensbilder, eftersom fluorescens är lätt att blekna och försvaga, för att omedelbart registrera resultaten av fotografering. Metoden är i princip densamma som vanlig mikrografering. Behöver bara använda höghastighetsfotografisk film som ASA200 ovan eller 24. ovan. Eftersom det ultravioletta ljuset på fluorescensbursteffekten, såsom FITC-markörer, i ultraviolett ljusbestrålning 30s, minskade fluorescensljusstyrkan med 50%. Därför är exponeringshastigheten för låg för att fånga fluorescensbilden. Allmän forskning fluorescensmikroskop har halvautomatiska eller helautomatiska mikrofotografisystemenheter.
Försiktighetsåtgärder:
(1) Arbeta i strikt enlighet med kraven i fluorescensmikroskopets fabrikshandbok, ändra inte proceduren godtyckligt.
(2) Inspektionen bör utföras i mörkrummet. Efter att ha kommit in i mörkrummet ansluter du strömförsörjningen, tänder ultrahögtryckskvicksilverlampan i 5-15min, vänta tills ljuskällan avger ett starkt ljus för att stabilisera sig och ögonen är helt anpassade till mörkrummet, och börja sedan observera provet.
(3) För att förhindra skador på ögonen från ultraviolett ljus bör skyddsglasögon användas när ljuskällan justeras.
(4) kontrollera tiden varje gång till 1 ~ 2h är lämpligt, mer än 90min, ultrahögtrycks kvicksilverlampans ljusstyrka minskade gradvis, fluorescens försvagades; exemplar bestrålade med ultraviolett ljus 3 ~ 5min, fluorescensen är också signifikant försvagad; därför ska * inte vara mer än 2 ~ 3h.
(5) fluorescensmikroskop ljuskällans livslängd är begränsad, provet bör centraliseras inspektion, för att spara tid och skydda ljuskällan. När det är varmt, bör läggas fläktkylning, ny glödlampa bör registreras från början av användningen av tid. När lampan är släckt och vill användas igen måste glödlampan kylas tillräckligt innan den tänds. Ljuskällan bör undvikas flera gånger.
(6) Observera provet omedelbart efter färgning, eftersom fluorescensen gradvis kommer att minska med tiden. Om provet placeras i en plastpåse av polyeten som förvaras vid 4 grader kan det fördröja tiden för fluorescensförsvagning och förhindra avdunstning av tätningsmedlet.
(7) Bedömningskriterier för fluorescensljusstyrka: allmänt indelad i fyra nivåer, det vill säga "en" - ingen eller synlig svag fluorescens. '+' - endast tydlig synlig fluorescens. '+ +' - synlig med en ljus
