Fluorescensmikroskopi principer och strukturella egenskaper
Fluorescensmikroskopi är användningen av en hög luminescenseffektivitet av punkten, genom filtrering av färgsystemet för att avge en viss våglängd av ljus (såsom ultraviolett 3650 in i eller violett-blått 4200 in i) som excitationsljuset, excitationen av fluorescerande material i provet avger en mängd olika färger av fluorescens och förstoras sedan genom objektivet och okularen för observation. På detta sätt, i den starka kontrastbakgrunden, även om fluorescensen är mycket svag, är den lätt att identifiera, hög känslighet, främst används för att studera cellstruktur och funktion och kemisk sammansättning. Grundstrukturen för ett fluorescensmikroskop är sammansatt av ett vanligt optiskt mikroskop plus några tillbehör (som en fluorescensljuskälla, excitationsfilter, tvåfärgade strålseparatorer och blockeringsfilter, etc.). Fluorescerande ljuskälla - allmänt använd ultrahögtryckskvicksilverlampa (50-200W), som kan avge en mängd olika våglängder av ljus, men varje fluorescerande material har den starkaste fluorescensexcitationsvåglängden, så behovet av att lägga till excitationsfilter (i allmänhet ultraviolett, violett, blått och grönt excitationsfilter), så att endast en viss våglängd av excitationsljus genom bestrålning av prover, medan det andra ljuset absorberas. Så det är nödvändigt att lägga till ett excitationsfilter (vanligtvis ultraviolett, violett, blått och grönt excitationsfilter), så att endast en viss våglängd av excitationsljus genom provet, medan annat ljus absorberas. När varje ämne bestrålas med excitationsljus avger det synlig fluorescens med en längre våglängd än det bestrålade ljuset inom en mycket kort tid. Fluorescens har specificitet, i allmänhet svagare än excitationsljuset, för att kunna observera den specifika fluorescensen måste objektivlinsen bakom behovet av att lägga till blockering (eller undertryckning) väljas att använda.
Fluorescensmikroskop och vanligt mikroskopskillnad
1. Belysningsmetoden är vanligtvis fallande, det vill säga ljuskällan projiceras på provet genom objektivlinsen;
2. Ljuskällan är ultraviolett ljus, med kortare våglängd och högre upplösningsförmåga än vanliga mikroskop;
3. Det finns två speciella filter, det ena framför ljuskällan används för att filtrera bort synligt ljus, och det mellan okularet och objektivlinsen används för att filtrera bort ultraviolett ljus för att skydda det mänskliga ögat.
Fluorescensmikroskop är också ett slags optiskt mikroskop, den största skillnaden är att excitationsvåglängden för de två är olika. Detta bestämmer strukturen för fluorescensmikroskopet och det vanliga optiska mikroskopet och användningen av olika metoder.
Fluorescensmikroskop är det grundläggande verktyget för immunfluorescenscytokemi. Den består av ljuskälla, filterplattesystem och optiskt system och andra huvudkomponenter. Den använder en viss våglängd av ljus för att stimulera provet att avge fluorescens, som förstoras genom objektivlinsen och okularsystemet för att observera fluorescensbilden av provet.
