Hur fluorescensmikroskopi skiljer sig från konfokal lasermikroskopi
Fluorescensmikroskop
1, fluorescensmikroskop är att använda ultraviolett ljus som en ljuskälla, som används för att bestråla föremålet som ska undersökas, så att det avger fluorescens, och sedan observera föremålets form och dess placering under mikroskopet. Fluorescensmikroskop används för att studera absorption, transport, distribution och lokalisering av kemiska ämnen i celler. Vissa ämnen i cellen, såsom klorofyll, kan fluorescera efter bestrålning med ultraviolett ljus; det finns vissa ämnen som inte kan fluorescera av sig själva, men om de färgas med fluorescerande färgämnen eller fluorescerande antikroppar kan de också fluorescera efter bestrålning med ultraviolett ljus, och fluorescensmikroskopi är ett av verktygen för kvalitativ och kvantitativ forskning av denna typ av ämnen.
2, fluorescensmikroskopprincip:
(A) ljuskälla: ljuskällan utstrålar olika våglängder av ljus (i ultraviolett till infrarött).
(B) excitationsfilter källa: genom provet kan producera fluorescens av en specifik våglängd av ljus, samtidigt som det blockerar excitationen av fluorescens värdelöst ljus.
(C) Fluorescerande prov: vanligtvis färgat med en fluorokrom.
(D) Blockerande filter: blockera excitationsljus som inte absorberas av provet för att selektivt överföra fluorescens, och vissa våglängder i fluorescensen överförs också selektivt. Ett mikroskop som använder ultraviolett ljus som ljuskälla för att få det bestrålade föremålet att fluorescera. Elektronmikroskopet monterades första gången 1931 i Berlin, Tyskland av Knorr och Haroska. Detta mikroskop använder en höghastighetselektronstråle istället för en ljusstråle. Eftersom våglängden på elektronströmmen är mycket kortare än ljusvågen, så kan förstoringen av elektronmikroskopet vara upp till 800,000 gånger, upplösningen för minimigränsen på 0,2 nanometer . 1963 började använda svepelektronmikroskop kan ses på ytan av objektets lilla struktur.
3, tillämpningsområdet: används för att förstora bilden av små föremål. Används generellt inom biologi, medicin, mikroskopiska partiklar och andra observationer.
Konfokalmikroskop
1, konfokalmikroskop i det reflekterade ljuset på vägen plus en halvreflekterande halvlins, kommer att ha varit genom linsen av det reflekterade ljuset vikt i andra riktningar, i sitt fokus på en baffel med ett nålhål, är hålet beläget i fokus, bakom baffeln finns ett fotomultiplikatorrör. Man kan föreställa sig att det reflekterade ljuset före och efter brännpunkten för detektorljuset genom denna uppsättning av konfokalsystem, inte kommer att kunna fokusera på det lilla hålet, kommer att blockeras av baffeln. Så fotometern mäter intensiteten av det reflekterade ljuset vid brännpunkten.
2, princip: det traditionella optiska mikroskopet använder en fältljuskälla, bilden av varje punkt på provet kommer att störas av diffraktion eller spridning av ljus från närliggande punkter; laserskanning konfokalmikroskop använder en laserstråle genom det upplysande nålhålet för att bilda en punktkälla av ljus på provet i fokalplanet för skanningen av varje punkt på provet, provet bestrålas, i detektionen av nålhålet vid avbildningen , genom detektering av nålhålet efter fotomultiplikatorröret (PMT) eller kallelektrokopplingsanordningen (cCCD) punkt för punkt eller punkt för punkt eller punkt för punkt, mäts ljusintensiteten med en fotometer. cCCD) tar emot punkt för punkt eller linje för linje och bildar snabbt en fluorescerande bild på datorskärmen. Belysningsnålhålet och detektionsnålshålet i förhållande till objektivlinsens fokalplan är konjugerat, punkten på fokalplanet fokuserar samtidigt på belysningsnålhålet och emissionsnålhålet, punkten utanför fokalplanet kommer inte att vara i detektionsnålhålet kl. avbildningen, så att den konfokala bilden är exemplaret av det optiska tvärsnittet, och övervinner bristerna med de suddiga bilderna i vanliga mikroskop.
3, Användningsområden: medicin, djur- och växtforskning, biokemi, bakteriologi, cellbiologi, vävnadsembryologi, livsmedelsvetenskap, genetik, farmakologi, fysiologi, optik, patologi, botanik, neurovetenskap, marinbiologi, materialvetenskap, elektronikvetenskap, mekanik, petroleumgeologi, mineralogi.
