Förbättrade fördelar med laserskannande multifotonmikroskop
Laserskanning multifotonmikroskop är en viktig förbättring av optiskt mikroskop, som främst visar att det kan observera den djupa strukturen av levande celler, fixerade celler och vävnader, och kan erhålla tydlig och skarp flerskikts Z-planstruktur, det vill säga optiska skivor , som kan användas för att konstruera den tredimensionella solida strukturen av prover. Konfokalmikroskop använder laserljuskälla, som fyller hela det bakre fokalplanet av objektivlinsen efter expansion, och passerar sedan genom objektivets linssystem för att konvergera till mycket små punkter på fokalplanet av provet. Enligt objektivlinsens numeriska bländare är diametern för den ljusaste belysningspunkten cirka 0.25 ~ 0.8μm och djupet är cirka 0.5 ~ 1.5 μm .. Storleken på sampolymerisationsfokus beror på mikroskopdesign, laservåglängd, objektivets egenskaper, scanningsenhetstillståndsinställning och provets egenskaper. Belysningsomfånget och skärpedjupsmikroskopet är mycket stort, medan belysningen av konfokalmikroskop är koncentrerad till ett * * fokus på fokalplanet. Den mest grundläggande fördelen med konfokalmikroskop är att det kan göra fina optiska skivor av tjocka fluorescerande prover (som kan nå 5 0 μm eller mer), och tjockleken på skivorna är cirka 0,5 till 1,5 μm. En serie optiska skivbilder kan erhållas genom att flytta provet upp och ner med Z-axelns stegmotor i mikroskopet. Insamlingen av bildinformation styrs i det första planet och kommer inte att störas av signaler från andra positioner på provet. Efter att ha tagit bort påverkan av bakgrundsfluorescens och ökat signal-brusförhållandet förbättras uppenbarligen kontrasten och upplösningen av konfokal bild jämfört med traditionell fältbelysningsfluorescensbild. I många exemplar är många intrikata strukturella komponenter sammanflätade för att bilda ett komplext system, men när tillräckligt många optiska sektioner kan samlas in kan vi rekonstruera dem i tre dimensioner med programvara. Denna experimentella metod har använts i stor utsträckning inom biologisk forskning för att klargöra det komplexa strukturella och funktionella förhållandet mellan celler eller vävnader.
