Introduktion till fördelar och nackdelar med multifotonlaserskanningsmikroskopi
1. Genom att använda rött ljus eller infrarött ljus för att excitera är ljusspridningen liten, och spridningen av små partiklar är omvänt proportionell mot våglängdens fjärde potens.
2. Mer spridda fotoner från avbildningstvärsnittet kan samlas in utan behov av nålhål.
3. Nålhålet kan inte särskilja spridda fotoner som emitteras från det oskärpa området eller fokusområdet, och signal-brusförhållandet för multifotonavbildning i djupa lager är bra.
4. Det ultravioletta eller synliga ljuset som används för excitation med en foton absorberas lätt och dämpas av provet innan strålen når fokalplanet och är svårt att excitera djupa lager.
5. När det gäller biologiska mikroskopobservationer är det första övervägandet att inte skada det aktiva tillståndet hos själva organismen och att upprätthålla flödet av vatten, jonkoncentration, syre och näringsämnen. Vid ljusobservation måste både värme och fotonenergi hålla sig inom bestrålningsmängden och ljusenergin så att cellerna inte skadas.
6. Multifotonmikroskopi har många fördelar. Såsom tredimensionell upplösning, djupgenomträngning, spridningseffektivitet, bakgrundsljus, signal-brusförhållande, kontroll etc. har alla egenskaper som tidigare lasermikroskop inte hade eller inte kunde jämföra med.
Nackdelar med multifoton laser scanning mikroskopi:
1. Den kan bara avbilda fluorescens.
2. Om provet innehåller kromoforer som absorberar excitationsljus kan provet vara termiskt skadat.
3. Upplösningen är något reducerad. Även om det kan förbättras genom att använda konfokala hål samtidigt, finns det signalförlust.
4. Begränsad av dyra ultrasnabba lasrar är kostnaden för multifotonskanningsmikroskop relativt hög.
