Metoder för beredning av prover för optisk och elektronmikroskopi av filmer
Mikrofilmningsmetoden omfattar generellt fyra kategorier: sektioneringsmetod, övergripande förseglingsmetod, beläggningsmetod och pressningsmetod.
① Skivningsmetod. Optiskt mikroskop skivtjocklek mellan 2 till 25 mikron, allmänt växt- och djurmaterial, skivan är cirka 10 mikron tjock är lämplig. Sektionsmetoden varierar beroende på de olika inbäddningsmedlen. Vanligtvis används paraffinsektioneringsmetod, bomullslimsektioneringsmetod, fryst sektioneringsmetod och glykolmetakrylatmetoden (kallad GMA-metoden). Paraffinsnittningsmetoden inkluderar stegen fixering, inbäddning, sektionering, färgning, uttorkning och försegling. Nyckeln är att bädda in biomaterialet i paraffinvax och använda paraffinvax som stöd för att skära biomaterialet nedsänkt i vaxblocket i idealiska tunna skivor. Operationsprocessen är som följer: fixering → vattentvätt → steg-för-steg från låg till hög koncentration alkoholdehydrering → xylentransparens → vaxnedsänkning → inbäddning → sektionering → lappning → xylenavvaxning → steg-för-steg från hög till låg koncentration alkoholbehandling, och slutligen övergång till vatten → färgning → steg-för-steg från låg till hög koncentration av alkoholuttorkning → xylentransparens → tätning med hartslim. De grundläggande stegen är desamma i alla typer av filmskapande tekniker.
② Integral tätningsmetod. Används för enstaka celler, små organismer eller dispergerade organ av helmonterad filmmetoden. Denna metod kräver också olika steg av fixering, färgning, uttorkning, transparens och försegling. Denna metod används för beredning av mundelar av spetsvingar och insekter.
Smörjningsmetod. En metod för framställning där ett lätt dispergerat biologiskt prov beläggs på ett objektglas. Blodutstryk är ett exempel.
④Tryckningsmetod. De naturliga, lätt spridda vävnaderna eller lätt spridda vävnader efter behandling, såsom animaliska spermatocyter, rotspetsceller, etc. på objektglaset, plus ett täckglas, och sedan kraftfullt krossa vävnaderna, så att cellerna eller intracellulära strukturer sprids till ett lager av filmningsmetoder. Pressmetoden används ofta för att observera kromosomer, vanligtvis färgade med magentaacetat, lavröd och karbolsyraröd.
