Principer och strukturella egenskaper hos fluorescensmikroskop
Fluorescensmikroskop använder en mycket effektiv punktljuskälla för att avge en viss ljusvåglängd (såsom ultraviolett ljus 3650 eller lila blått ljus 4200) genom ett färgfiltersystem som excitationsljus, som väcker fluorescerande ämnen i provet för att avge olika fluorescensfärger och sedan observeras genom magnifikationen av objektivet. På detta sätt, även med svag fluorescens i en stark bakgrund, är det lätt att känna igen och har hög känslighet. Det används främst för att studera cellstruktur, funktion och kemisk sammansättning. Den grundläggande strukturen för ett fluorescensmikroskop består av ett regelbundet optiskt mikroskop och vissa tillbehör såsom en fluorescerande ljuskälla, exciteringsfilter, dubbelfärgstråldelare och blockerande filter. Fluorescerande ljuskälla - använder vanligtvis ultratika tryckkvicksilverlampor (50-200 W), som kan avge ljus från olika våglängder, men varje fluorescerande substans har en excitationsljusvåglängd som ger stark fluorescens. Därför måste excitationsfilter (vanligtvis ultraviolett, lila, blå och gröna excitationsfilter) läggas till för att tillåta en viss våglängd för excitationsljus att passera och bestrålar provet, samtidigt som det absorberar allt annat ljus. Efter att ha bestrålats med excitationsljus avger varje substans synlig fluorescens med en våglängd längre än bestrålningsvåglängden på mycket kort tid. Fluorescens har specificitet och är i allmänhet svagare än excitationsljus. För att observera specifik fluorescens måste ett blockerande (eller undertryckande) filter läggas till bakom objektivlinsen. Dess funktioner är tvåfaldiga: för det första att absorbera och blockera excitationsljus från att komma in i okularet för att undvika störande fluorescens och skada ögonen; För det andra, för att välja och tillåta specifik fluorescens att passera, uppvisa en specifik fluorescerande färg. Två typer av filter måste användas i kombination.
