För- och nackdelar med multifotonlaserskanningsmikroskopi
Multi-Photon Laser Scanning Microscopy är en experimentell metod baserad på laserskanningsmikroskopteknologin, som ger mer **optisk sektionsförmåga vid 3D-observation. Multifotonfluorescensexcitationsmetoden använder långa våglängder av rött eller nära-infrarött ljus för att ta högupplösta fluorescerande bilder av prover med minimal dödande av aktiva prover, vilket gör den lämplig för avbildning av levande celler, särskilt tjocka levande vävnader som hjärnskivor, embryon, hela organ och till och med hela organismer.
Fördelarna är följande:
1, användningen av rött ljus eller infrarött ljus excitation, ljusspridning är liten(spridningen avsmåpartiklar och våglängden för fjärde potensen av det omvända förhållandet).
2, kräver inget nålhål, kan samla in fler spridda fotoner från avbildningstvärsnittet.
3, nålhålet kan inte skilja mellan de spridda fotoner som emitteras av den ofokuserade regionen eller fokalområdet, multi-foton i den djupa bildens signal-brusförhållande är bra.
4, singelfotonexcitation av ultraviolett eller synligt ljus som används i strålen för att nå fokalplanet innan provet lätt absorberas och dämpas, inte lätt till djup excitation.
5, i den biologiska mikroskopobservationen, * det första övervägandet är att inte skada det aktiva tillståndet hos själva organismen, för att upprätthålla vatten, jonkoncentration, syre- och näringscirkulation. Vid ljusobservationstillfällen måste både termisk energi och fotonenergi stanna i cellen utan att skada mängden bestrålning, ljusenergi.
6, multi-foton mikroskop har också många fördelar. Såsom tredimensionell upplösning, djupintrång, i spridningseffektivitet, bakgrundsljus, signal-brusförhållande, kontroll, etc., det finns tidigare lasermikroskop som inte har eller har ojämförliga utöver egenskaperna.
Multi-foton konfokalt laserskanningsmikroskop har utvidgats till olika forsknings- och tillämpningsområden. Den är kapabel till tredimensionell icke-förstörande observation av prover i deras naturliga tillstånd och kan förbättra systemets upplösning och signal-brusförhållande. Genom att använda ändringen av materialegenskaper efter multi-fotonexcitering är det också möjligt att uppnå tredimensionell höjddatalagring och tredimensionell mikrotillverkning i vilken riktning som helst, vilket har ett högt tillämpningsvärde. Man kan tro att med den fortsatta utvecklingen av maskiner, material, laserteknik och andra teknologier relaterade till multifoton konfokal mikroskop, kommer multifoton konfokal laserskanning mikroskop att vara större utveckling och bredare tillämpning.
Nackdelarna är följande:
1, endast fluorescensavbildning.
2, om provet innehåller kromoforer som kan absorbera excitationsljuset, Till exempelpigment, provexemplaretkan vara termiskt skadad.
3, är upplösningen något reducerad, faständen kan förbättras genom samtidig användning av konfokal bländare, mendet kommer att bli signalförlust.
4. Kostnaden för multifoton scanning mikroskopi är hög på grund av begränsningen av dyra ultrasnabba lasrar.
