Skillnaden mellan fluorescerande och laserkonfokalmikroskopi
fluorescensmikroskop
1. Fluorescensmikroskop är en enhet som använder ultraviolett ljus som ljuskälla för att belysa föremålet som testas, vilket får det att avge fluorescens och sedan observera formen och positionen på föremålet under mikroskopet. Fluorescensmikroskopi används för att studera absorption, transport, distribution och lokalisering av ämnen i celler. Vissa ämnen i celler, såsom klorofyll, kan avge fluorescens efter att ha exponerats för ultraviolett strålning; Vissa ämnen i sig kanske inte avger fluorescens, men om de färgas med fluorescerande färgämnen eller fluorescerande antikroppar kan de också avge fluorescens under ultraviolett strålning. Fluorescensmikroskopi är ett av verktygen för kvalitativ och kvantitativ forskning om dessa ämnen.
2. Principen för fluorescensmikroskop:
(A) Ljuskälla: Ljuskällan avger ljus med olika våglängder (från ultraviolett till infrarött).
(B) Ljuskälla för excitationsfilter: sänder ljus med en specifik våglängd som kan producera fluorescens i provet, samtidigt som det blockerar ljus som är värdelöst för excitationsfluorescens.
(C) Fluorescerande prover: vanligtvis färgade med fluorescerande pigment.
(D) Blockerande filter: överför selektivt fluorescens genom att blockera excitationsljus som inte har absorberats av provet, och vissa våglängder överförs också selektivt i fluorescens. Ett mikroskop som använder ultraviolett ljus som ljuskälla för att avge fluorescens från det bestrålade föremålet. Elektronmikroskopet monterades först av Knorr och Harroska i Berlin, Tyskland 1931. Denna typ av mikroskop använder en höghastighetselektronstråle istället för en ljusstråle. På grund av elektronflödets mycket kortare våglängd jämfört med ljusvågor kan förstoringen av elektronmikroskopet nå 800000 gånger, med en lägsta upplösningsgräns på 0,2 nanometer. Svepelektronmikroskopet, som började användas 1963, låter människor se de små strukturerna på ytan av föremål.
3. Användningsomfång: Används för att förstora bilder av små föremål. Används vanligtvis för observation av biologi, medicin, mikroskopiska partiklar, etc.
konfokalmikroskop
1. Ett konfokalmikroskop lägger till en halvreflekterande lins till den reflekterade ljusbanan, som böjer det reflekterade ljuset som redan har passerat genom linsen i andra riktningar. Det finns en baffel med ett nålhål i sin brännpunkt, och det lilla hålet är placerat i brännpunkten. Bakom baffeln finns ett fotomultiplikatorrör. Man kan föreställa sig att det reflekterade ljuset före och efter detekteringsljusfokuspunkten inte kan fokuseras på det lilla hålet genom detta konfokala system och kommer att blockeras av baffeln. Så fotometern mäter intensiteten av reflekterat ljus vid brännpunkten.
2. Princip: Traditionella optiska mikroskop använder fältljuskällor, och bilden av varje punkt på provet kommer att påverkas av diffraktion eller spritt ljus från närliggande punkter; Laser scanning konfokalmikroskop använder en laserstråle för att bilda en punktljuskälla genom ett upplyst pinhole för att skanna varje punkt i provets fokalplan. Den upplysta punkten på provet avbildas vid detektionsnålhålet och tas emot punkt för punkt eller linje av ett fotomultiplikatorrör (PMT) eller en termoelektrisk kopplingsanordning (cCCD) efter detektionsnålhålet, vilket snabbt bildar en fluorescerande bild på datorskärmen skärm. Belysningsnålhålet och detektionsnålhålet är konjugerade i förhållande till objektivlinsens fokalplan. Punkterna på fokalplanet fokuseras samtidigt på belysningsnålhålet och emissionsnålhålet, och punkter utanför fokalplanet kommer inte att avbildas vid detektionsnålhålet. Detta resulterar i en konfokal bild som representerar det optiska tvärsnittet av provet, vilket övervinner nackdelen med suddiga bilder i konventionell mikroskopi.
3. Användningsområden: involverar medicin, djur- och växtforskning, biokemi, bakteriologi, cellbiologi, vävnad och embryo, livsmedelsvetenskap, genetik, farmakologi, fysiologi, optik, patologi, botanik, neurovetenskap, marinbiologi, materialvetenskap, elektronisk vetenskap, mekanik, petroleumgeologi och mineralogi.
