Strukturen och huvudkomponenterna i ett fluorescensmikroskop
(1) Ljuskälla
Nuförtiden används vanligtvis en 200W kvicksilverlampa med ultrahögt tryck som ljuskälla. Den är gjord av kvartsglas, med en sfärisk form i mitten och en viss mängd kvicksilver fylld inuti. Under drift gör urladdningen mellan de två elektroderna att kvicksilvret avdunstar och trycket inuti sfären ökar snabbt. När kvicksilvret avdunstar helt kan det nå 50-70 standardatmosfärstryck, vilket vanligtvis tar cirka 5-15 minuter. Luminescensen hos kvicksilverlampor med ultrahögt tryck är resultatet av urladdningen mellan elektroderna, som kontinuerligt dissocierar och reducerar kvicksilvermolekyler och avger fotoner. Det avger starkt ultraviolett och blåviolett ljus, vilket är tillräckligt för att excitera olika fluorescerande ämnen, därför används det ofta i fluorescensmikroskop.
Ultrahögtryckskvicksilverlampor avger också en stor mängd värmeenergi. Därför måste lamprummet ha goda värmeavledningsförhållanden och arbetsmiljötemperaturen bör inte vara för hög.
Den nya kvicksilverlampan med ultrahögt tryck kräver ingen hög spänning för att tändas i ett tidigt skede av användning. Efter en tids användning måste den startas med högspänning (ca 15000V). Efter start hålls arbetsspänningen i allmänhet vid 50-60V och arbetsströmmen är cirka 4A. Den genomsnittliga livslängden för en 200W kvicksilverlampa med ultrahögt tryck är cirka 200 timmar när den används i 2 timmar varje gång. Ju kortare drifttid, desto kortare livslängd. Om den endast används i 20 minuter en gång minskar livslängden med 50 %. Försök därför att minimera antalet starter när du använder. Ljuseffektiviteten hos en glödlampa minskar gradvis under användning. När lampan har slocknat måste den vänta på kylning innan den startas om. Efter att ha tänt glödlampan bör den inte stängas av omedelbart för att undvika ofullständig avdunstning av kvicksilver och skador på elektroden. I allmänhet måste den vänta i 15 minuter. På grund av det höga trycket och den starka ultravioletta strålningen från ultrahögtryckskvicksilverlampan måste glödlampan placeras i lampkammaren innan den tänds för att undvika ögonskada och explosion under drift.
Kretsen för en ultrahögtryckskvicksilverlampa (100W eller 200W) ljuskälla och dess komponenter inklusive spänningsomvandling, strömundertryckning och start. Det finns ett system för att justera glödlampans ljuscentrum i lamprummet, med en aluminiumpläterad konkav reflektor installerad bakom glödlampan och en ljussamlande lins installerad i fronten.
Den inhemskt producerade ultrahögtryckskvicksilverlampan GCQ-200 har bra prestanda och kan ersätta importerade glödlampor som HBO-200, med en genomsnittlig livslängd på över 200 timmar och ett relativt lågt pris.
En enkel och bärbar högfärgstemperatur brom volfram fluorescerande ljuskälla utvecklad i Kina, med liten volym, låg vikt, låg effekt, dubbel användning av AC och DC (med inbyggd DC-strömförsörjning), lätt att bära, bekväm att använda , har främjats och tillämpats.
(2) Färgfiltreringssystem
Färgfiltersystemet är en viktig del av ett fluorescensmikroskop, bestående av en excitationsfilterplatta och en kompressionsfilterplatta. Modellen av filterplattan är ofta inkonsekvent bland tillverkarna. Filterplattor är vanligtvis uppkallade efter den grundläggande färgtonen, där den första bokstaven representerar färgtonen, den andra bokstaven representerar glaset och siffran representerar modellens egenskaper. Olympus mikroskop
(3) Objektiv lins
Olika objektivlinser kan användas, men att använda akromatiska objektivlinser är lämpliga för fluorescens på grund av deras extremt låga självfluorescens och transmittansprestanda (våglängdsområde). På grund av det faktum att fluorescensljusstyrkan för bilden i mikroskopets synfält är direkt proportionell mot kvadraten på objektivlinsens bländarförhållande och omvänt proportionell mot dess förstoring, för att förbättra ljusstyrkan i fluorescensbilden, är en objektivlins med ett större bländarförhållande bör användas. Speciellt vid hög förstoring är dess påverkan mycket betydande. För prover med otillräcklig fluorescens bör därför en objektivlins med hög bländare användas, kombinerad med ett okular så lågt som möjligt (4 x, 5 x, 6,3 x, etc.).
(4) Reflexspegel
Det reflekterande lagret av en reflektor är i allmänhet aluminiumpläterat eftersom aluminium absorberar mindre ultraviolett och synligt ljus i det blålila området, med en reflektion på över 90 %, medan silver endast reflekterar 70 %; I allmänhet används platta reflektorer.
(5) Spotlight spegel
Koncentratorn designad och gjord speciellt för fluorescensmikroskopi är gjord av kvartsglas eller annat glas som sänder ut ultraviolett ljus. Det finns två typer av mörka fältspotters med distinkt synfält. Det finns också en differentiell fluorescenskoncentrator.
(6) Fallljusanordning
Den nya typen av fallljusanordning reflekterar de kortare våglängdsdelarna (ultraviolett och lila blå) från ljuskällan till interferensspektrofotometerfiltret på grund av egenskaperna hos beläggningen på filtret. När filtret är vänt mot ljuskällan i 45 graders vinkel. När den lutas riktas den vertikalt mot objektivlinsen och riktas mot preparatet genom objektivlinsen, vilket gör att preparatet exciteras. Vid denna tidpunkt fungerar objektivlinsen direkt som en kondensor. Samtidigt är de långa delarna av filtret (grön, gul, röd, etc.) genomskinliga för filtret, så de reflekteras inte i riktning mot objektivet. Filtret fungerar som en excitationsfilterplatta och eftersom fluorescensen hos provet är i området med långa våglängder för synligt ljus, kan det observeras genom filtret och nå målet. Ljusstyrkan på fluorescensbilden ökar med förstoring och är starkare än den transmitterade ljuskällan vid hög förstoring. Utöver sin funktion som en transmissiv ljuskälla är den mer lämpad för direkt observation av ogenomskinliga och halvtransparenta prover, såsom tjocka plattor, filtermembran, kolonier, vävnadsodlingsprover etc. Under senare år har nyutvecklade fluorescensmikroskop ofta använda fallljusanordningar, så kallade fallljusfluorescensmikroskop.
