Vilka provspecifikationer behövs för ljusmikroskopi?
I provberedningsprocessen för det optiska mikroskopet är skivans tjocklek mellan 2-25um; skivtjockleken på elektronmikroskopet är inom 50-100nm (förutom högspänningselektronmikroskopet, vars provtjocklek kan nå 1um), så skivmetoden som används är inte densamma.
När det gäller bärare är bäraren för den optiska mikroskopsektionen objektglas, medan bäraren för elektronmikroskopsektionen är rutnät.
När det gäller fixering fixeras skivorna av det optiska mikroskopet med ett sammansatt fixativ, medan skivorna i elektronmikroskopet fixeras upprepade gånger med ett enda fixativ.
När det gäller färgning är färgningen av optiska prov relativt enkel. Enligt olika observationsprover och typer av optiska mikroskop räcker det oftast med att färga med några fasta färgningsmedel. Det finns många och komplicerade metoder för att färga om elektronmikroskopprover, såsom negativ färgning, silverfärgning och så vidare.
När det gäller inbäddning används paraffin, kollodium, gelatin etc. som inbäddningsmedel för optiska mikroskopsektioner; epoxiharts, polystyrenharts, isobutylenharts och vattenlösligt harts används som inbäddningsmedel för elektronmikroskopsektioner.
För att säkerställa att mikroskopets synfält kan vara jämnt och fullt upplyst, måste det optiska belysningssystemet justeras när mikroskopet först installeras och felsöks. Detta är ett viktigt medel och det mest grundläggande sättet att använda mikroskopet korrekt och få korrekta och tillförlitliga resultat. krav. Dessutom är korrekt behärskning av justeringen av belysningssystemets optiska vägsystem ett nödvändigt steg efter byte av ljuskällans glödlampa under användningen av mikroskopet, och det är också ett nödvändigt sätt att kontrollera mikroskopets prestanda då och då under dagliga använda sig av. Justeringen av det optiska vägsystemet för mikroskopbelysningen omfattar huvudsakligen följande fyra punkter: 1. Preliminär justering av ljuskällans lampkammare utanför mikroskopet ① Öppna lampkammarens skal först, tryck på fjäderklämman för att sätta halogenlampan i sockel, och undvik direktkontakt med glödlampan med fingrarna under installationen (kan separeras med mjuk trasa eller papper) för att undvika Det finns fingeravtryck och annan smuts på glödlampan, vilket kommer att påverka glödlampans livslängd. ②Sätt lamphuset på bordet, efter att ha slagit på strömmen, använd en speciell skruvmejsel för att justera lampans fokusknappshål (markerat med "←→"), så att glödtråden projiceras på väggen 1-2 m bort och filamentbilden justeras. Justera sedan lampans höjd och justera gänghålet (markerat med "──") för att göra glödtrådens position lämplig; justera sedan lampans vänstra och högra läge för att justera skruvhålet (markerat med "──") för att göra det vänstra och högra läget för glödtråden lämpligt .
2. Syftet med att kontrollera och korrigera ljuskällans (glödtrådens) position i mikroskopet är att justera bildänden av belysningsmedlet rakt in i objektivlinsens synfält, och att säkerställa att synfältet av mikroskopet är helt och jämnt belyst från ljuskällans perspektiv. Belysning, som är en förutsättning för justering av Kuhlers belysningssystem. Grundläggande verktyg som behövs: Centreringsteleskopet är utrustat när mikroskopet köps. ① Koppla ur den frostade glashylsan i lamphuset och sätt tillbaka lamphuset på mikroskopet. ② Välj en 10× objektivlins, slå på ljuskällans program för att hitta provet och fokusera det tydligt, och använd sedan en 40× objektiv för att fokusera provet tydligt (40× objektiv Du kan se hela bilden av glödtråden ); ③ Öppna öppningsmembranet och fältmembranet på kondensorn maximalt; ④ Koppla ur ett av okularen, ersätt med ett centrerande teleskop, ta tag i den vita delen, sträck ut det svarta okularet med den andra handen. Du kan se glödtrådsbilden i synfältet; ⑤ Om positionen för glödtråden inte är lämplig, justera "──"-hålet för att justera glödtrådsbilden i horisontell riktning, och justera "──"-hålet för att justera glödtrådsbilden i vertikal riktning tills Justera glödtrådsbilden till den ljusa cirkulära bilden som precis fyller objektivlinsens bländare; ⑥ Efter justeringen, sätt tillbaka den frostade glashylsan till ursprungspositionen, koppla ur centreringsteleskopet och sätt tillbaka okularet för nästa justering. Ovannämnda justering av belysningsljuskällans lampkammare utanför mikroskopet och verifieringen av läget för ljuskällans ljuskropp inuti mikroskopet behöver endast utföras när mikroskopet först installeras och felsöks och när glödlampan byts ut , och mikroskopet kan inte justeras slumpmässigt när du använder mikroskopet. I händelse av förvirring kan den justeras tillbaka till det ursprungliga tillståndet enligt ovanstående steg.
3. Korrekt justering av Kohlers belysningssystem En av huvuduppgifterna för korrekt justering av mikroskopet är justeringen av belysningens optiska vägsystem, och nyckeln är justeringen av Kohlers belysningssystem. För varje person som använder ett mikroskop, särskilt de som fotograferar mikroskop, bör de ha en viss förståelse och behärskning av principen för Kuhlers belysningssystem och dess justeringssteg för att ge fullt spel åt mikroskopets funktioner och ta bilder. Bilderna som kommer ut kan vara mer konsekventa och perfekta i effekt. Principen för Kohler-belysningssystemet är helt enkelt: ljuset som emitteras av någon punkt på ljuskällans belysning kan belysa synfältet för mikroskopet, och ljuset som sänds ut av varje punkt på ljuskällans belysningskälla samlas upp och i fältet av mikroskopet En mycket fullständig och enhetlig belysning uppnås. Syftet med att justera Kuhlers belysningssystem är att erhålla enhetlig och tillräcklig belysning för det observerade synfältet och att förhindra att ströljus påverkar eller stör bildsystemet, för att undvika imma på filmen under fotografering. Nödvändiga komponenter för ett högjusterat Kohler-belysningssystem: fältbländare, kondensorlinssystem som kan justeras på axeln. ① Välj 10× objektivlins och 10× okular ② Placera kondensorns främre lins i den optiska banan, justera bländaren till ett måttligt läge (inte för stort eller litet), höj sedan kondensorn till toppläge och justera kondensorns vridskiva till läge "J" för ljusfält ③ Justera fältmembranet till minimum (0,1)
④ Sätt det förseglade biologiska provet på scenen, slå på ljuskällan och fokusera tydligt
⑤ Det kommer att finnas ett delvis upplyst område eller ljus punkt i synfältet, vilket är den suddiga bilden av fältbländaren, där detaljerna i provet kan ses tydligt; utanför är det ett mörkare synfält, vilket kanske inte nödvändigtvis ser detaljerna i provet tydligt
⑥Justera kondensorn något nedåt så att den ljusa fläcken i synfältet gradvis krymper och gradvis blir en tydlig polygonal bild, vilket är den tydliga bilden av fältbländaren;
⑦I allmänhet är den polygonala bilden inte i mitten av synfältet, och det är nödvändigt att justera ett par centreringsskruvar på kondensorn för att justera den polygonala bilden av fältmembranet till mittläget;
⑧Öppna gradvis synfältets membran för att göra polygonbilden till en inskriven polygon i synfältet, och kontrollera ytterligare inriktningsstatus. Om inriktningen inte är idealisk, fortsätt att finjustera justeringsskruven;
⑨Öppna synfältets diafragma något så att dess polygonala bild bara försvinner på kanten av synfältet. Än så länge är justeringen av Kohlers belysningssystem klar. Efter att Kohler-belysningssystemet har justerats är hela synfältet jämnt upplyst och de tagna mikrofotografierna är ljusa och tydliga med normal kontrast.
