Jämförelse av konfokalmikroskop och vanligt optiskt mikroskop
Mikroskop är det viktigaste verktyget för att observera celler. Beroende på ljuskällan kan den delas in i två kategorier: optiskt mikroskop och elektronmikroskop. Den förra använder synligt ljus (ultraviolett mikroskop till ultraviolett ljus) som ljuskälla, medan den senare använder en elektronstråle som ljuskälla. Vanligt optiskt mikroskop och laserkonfokalmikroskop hör till samma optiska mikroskop.
I. Allmänt optiskt mikroskop
Vanligt biologiskt mikroskop består av tre delar, nämligen: ① belysningssystem, inklusive ljuskälla och kondensor; ② optiskt förstoringssystem, bestående av objektiv och okular, är huvuddelen av mikroskopet, för att eliminera sfärisk aberration och kromatisk aberration, är okularen och objektiven sammansatta av en komplex linsgrupp; ③ mekanisk enhet, som används för att fixa materialet och observation av bekvämlighet.
Mikroskop objekt är tydligt inte bara bestäms av förstoringen, men också med mikroskopets upplösningsförmåga (upplösning), upplösningsförmågan hänvisar till mikroskopet (eller det mänskliga ögat från målet 25cm) kan särskilja objektet zui små intervall av förmågan att särskilja storleken på upplösningsförmågan bestäms av ljusets våglängd och spegelns munhastighet och mediets brytningsindex, uttryckt i formeln:
R=0.61λ /NANA=nsin /2 där: n=mediets brytningsindex;=spegelns mynningsvinkel (provet på objektivlinsens mynning av spänningsvinkeln), NA=spegelns munhastighet (numerisk bländare). Vinkeln på spegelns mynning ska alltid vara mindre än 180?, så zui-värdet för sina/2 är nödvändigtvis mindre än 1.
Brytningsindex för glas som används vid tillverkning av optiska linser är 1,65 ~ 1,78, brytningsindex för mediet som används ju närmare glaset desto bättre. För torr objektivlins är mediet för luft, spegelmunhastighet i allmänhet 0.05 ~ 0,95; oljelins med cederträolja som medium, spegelns munhastighet kan vara nära 1,5.
Vanlig ljusvåglängd på 400~700nm, så mikroskopets upplösningseffektvärde kommer inte att vara mindre än 0,2μm, det mänskliga ögats upplösningsförmåga är 0,2mm, så den allmänna utformningen av mikroskopet zui förstoring är vanligtvis 1000X.
För det andra, laserkonfokalt scanningsmikroskop
Laserkonfokalt scanningsmikroskop (laserkonfokalt scanningsmikroskop), med en laser som skanningsljuskälla, punkt för punkt, linje för linje, yta för yta snabb scanning avbildning, scanningslaser och fluorescensuppsamling av ett gemensamt objektiv, objektiv scanningslaserfokuseringspunkt , men också momentan avbildning av objektpunkten. På grund av laserstrålens kortare våglängd är strålen mycket fin, så det konfokala laserskanningsmikroskopet har en hög upplösning, cirka 3 gånger den hos ett vanligt optiskt mikroskop. Systemet fokuseras en gång och skanningen är begränsad till ett plan av provet. När fokuseringsdjupet inte är detsamma kan bilderna av olika djupnivåer av provet erhållas, och denna bildinformation lagras i datorn, genom datoranalys och simulering, kan den visa den tredimensionella strukturen av cellprovet .
