Skillnaden mellan fluorescensmikroskop och laserkonfokalmikroskop
fluorescerande mikroskop
1. Fluorescensmikroskopet använder ultraviolett ljus som ljuskälla, som används för att bestråla det detekterade föremålet för att få det att avge fluorescens, och sedan observera formen och positionen på föremålet under mikroskopet. Fluorescensmikroskop används för att studera absorption, transport, distribution och lokalisering av kemiska ämnen i celler. Vissa ämnen i celler, såsom klorofyll, kan fluorescera efter att ha blivit bestrålade av ultravioletta strålar; Andra ämnen kan inte fluorescera av sig själva, men de kan fluorescera efter att ha färgats med fluorescerande färgämnen eller fluorescerande antikroppar och bestrålats med ultravioletta strålar. Fluorescensmikroskop är ett av verktygen för kvalitativ och kvantitativ forskning om dessa ämnen.
2, fluorescensmikroskopprincip:
(a) Ljuskälla: Ljuskällan utstrålar ljus med olika våglängder (från ultraviolett till infrarött).
(b) Excitationsfilterljuskälla: sändning av ljus med en specifik våglängd som kan få provet att fluorescera, samtidigt som det blockerar ljus som är värdelöst för excitationsfluorescens.
(c) Fluorescerande prover: vanligtvis färgade med fluorescerande pigment.
(d) Blockerande filter: blockerande excitationsljus som inte absorberas av provet för att selektivt överföra fluorescens, och vissa våglängder i fluorescensen överförs också selektivt. Ett mikroskop som använder ultraviolett ljus som ljuskälla för att få det bestrålade föremålet att avge fluorescens. Elektronmikroskopet sattes ihop av Knohl och Ha Roska i Berlin 1931. Detta mikroskop använder en höghastighetselektronstråle istället för en ljusstråle. Eftersom våglängden för elektronflödet är mycket kortare än ljusvågens, kan förstoringen av elektronmikroskop nå 800 tusen gånger, och den lägsta upplösningsgränsen är 0,2 nanometer. Svepelektronmikroskopet, som började användas 1963, kan få människor att se de små strukturerna på ytan av föremål.
3. Användningsområde: används för att förstora bilden av små föremål. Det används generellt för observation av biologi, medicin och mikroskopiska partiklar.
Konfokalmikroskop
1. Konfokalmikroskop lägger till en semi-reflekterande semi-lins på den optiska vägen för reflekterat ljus, som bryter det reflekterade ljuset som har passerat genom linsen till andra riktningar. Vid dess fokus finns en baffel med ett nålhål, och nålhålet är placerat vid fokus. Bakom baffeln finns ett fotomultiplikatorrör. Man kan föreställa sig att det reflekterade ljuset före och efter detektionsljusets fokus passerar genom detta konfokala system, och kommer inte att fokuseras på det lilla hålet, utan kommer att blockeras av baffeln. Så fotometern mäter intensiteten av reflekterat ljus i fokus.
2. Princip: Det traditionella optiska mikroskopet använder fältljuskällan, och bilden av varje punkt på provet kommer att störas av diffraktionen eller spritt ljus från de intilliggande punkterna; Laserskanningskonfokalmikroskopet skannar varje punkt i fokalplanet i provet genom att använda punktljuskällan som bildas av laserstrålen som passerar genom belysningshålet. Den bestrålade punkten på provet avbildas vid detektionsnålhålet, som tas emot punkt för punkt eller linje för punkt av fotomultiplikatorrör (PMT) eller kallkopplad anordning (cCCD) efter detektering av hålet, och en fluorescerande bild bildas snabbt på datorskärmen. Belysningsnålhålet och detektionsnålhålet är konjugerade med avseende på objektivlinsens fokalplan, och punkterna på fokalplanet fokuserar på belysningsnålhålet och emissionsnålhålet samtidigt, och punkterna utanför fokalplanet kommer inte att avbildas vid detektionsnålhålet, så att den konfokala bilden som erhålls är det optiska tvärsnittet av provet, vilket övervinner defekten med suddig bild i det vanliga mikroskopet.
3. Användningsområden: involverar medicin, djur- och växtforskning, biokemi, bakteriologi, cellbiologi, vävnad och embryo, livsmedelsvetenskap, genetik, farmakologi, fysiologi, optik, patologi, botanik, neurovetenskap, marinbiologi, materialvetenskap, elektronisk vetenskap, mekanik, petroleumgeologi och mineralogi.
