Funktioner för varje filter i ett fluorescensmikroskop
Det mest kritiska problemet med fluorescensmikroskopi är kombinationen av optiska filter. Både excitationsfiltret och avskärmningsfiltret måste vara lämpliga för det observerade fluorescerande materialet och matchade med varandra. För vissa specifika applikationer, om det finns fel vid val av filter, kan det leda till missförstånd och till och med felaktiga resultat. Prestationerna med fluorescensmikroskopiteknik är oskiljaktiga från filter av hög-kvalitet och smart matchade filtergrupper. Det finns flera typer av filter för fluorescensmikroskopi.
1. Värmeabsorberande filter
Värmeabsorberande filter är ett nödvändigt filter för att förhindra att värmestrålning i ljuskällans spektrum skadar det optiska systemet. Tidiga avancerade mikroskop var utrustade med trumformade flaskor som kunde hålla destillerat vatten som värmeabsorberande anordningar. Moderna storskaliga-forskningsmikroskop är utrustade med värmeabsorberande glasfilter i ljuskällslådor eller lampkammare, som är genomskinliga och lätt gula glasskivor. Leitz filter KG1 (2 mm) och BG38 (4 mm) kan överföra nästan alla ultravioletta och synliga ljusspektra, med en ljusgenomsläpplighet på upp till 98 %. Den absorberar endast selektivt infraröd fototermisk strålning.
2. Excitationsfilter
Excitationsfilter kan selektivt absorbera långa våglängdsspektrallinjer och endast sända ultraviolett ljus. Lila, blått och grönt ljusfilter är excitationsfilter. Zeiss, Reichert, Olympus B-serie, G-serie, BG-serie, Shotts UG-serie, Optons H, G, BP-serie, Leitz BP-serie och andra optiska filter är alla excitationsfilter.
3. Blockerande filter
Ett blockerande filter är ett filter som selektivt absorberar kortvågsspektrallinjer och infraröda strålar samtidigt som längre vågor kan ses. Dess funktion är att göra det möjligt för observatören att se fluorescensen exciterad av föremålet som inspekteras, samtidigt som den skyddar observatörens hornhinna från UV-skador.
4. Färgseparationsfilter
Färgseparationsfilter är en filterspegel som reflekterar excitationsljus på föremålet som inspekteras, vilket gör att föremålet avger fluorescens och sedan överför fluorescensen till okularet. Denna typ av filter kan endast användas i en kondensor med fallande ljus, medan ett fluorescensmikroskop för transmitterat ljus inte kräver färgseparation.
5. Interferensfilter
Interferensfilter är en typ av högpresterande excitationsfilter-. Det är ett filter tillverkat genom att stapla flera tunna metallfilmer mellan två polerade glasskivor. Brytningsindexet för varje tunn metallfilm är olika, så spektrallinjerna för olika våglängder hos belysningsljuskällan reflekteras upprepade gånger på varje metallfilm. Vissa spektrallinjer med vissa våglängder upphävs av destruktiv interferens, medan andra förstärks av additiv interferens och sänds igenom. Detta resulterar i ett filter med ett smalt transmissionsspektrum och en halv toppbredd på endast 6-20nm. Transmittansen kan nå 60% -70%.
