Avbildningsmetoder för ljusa och mörka fält av fluorescensmikroskopi
(1) Bright field imaging (BFI), som endast tillåter de överförda elektronerna i det paraxiella området att passera genom objektivets bländare och bildar en mörk bild på en ljus bakgrund. Ju mindre bländare objektivet har, desto större kontrast har den ljusa fältbilden; (2) Mörkfältsavbildning (DFI), som endast tillåter en del av en spridd stråle med stor vinkel eller en diffraktionsstråle av en kristall att passera genom objektivlinsens öppning, samtidigt som den sända strålen blockeras. Detta skapar en ljus grafisk bild på en mörk bakgrund. Denna mörka fält-avbildningsmetod kan förbättra kontrasten i bilder och är en viktig avbildningsmetod.
Det finns ungefär fyra metoder för fluorescensmikroskopi för att uppnå mörkfältsavbildning: (1) bibehålla vertikal belysning längs den optiska axeln samtidigt som objektivets öppning flyttas; (2) Användningen av sned belysning för att erhålla spridda strålar i den optiska axelns riktning kallas Center Dark Field Imaging (CDFI); (3) En objektivlinsöppning med en central stråleblockering och ett cirkulärt transparent område; (4) Använd en cirkulär genomskinlig spotlight för att detektera ljus och en objektivöppning med ett centralt cirkulärt hål. * Metoderna här är enkla och bekväma, men de använder elektronisk bildbehandling i den bortre ärmregionen, vilket resulterar i stora aberrationer och dålig bildkvalitet. Den andra metoden kan undvika ovanstående nackdelar, men den objektiva öppningen i Leica-fluorescensmikroskopet tar bara emot en liten del av spridda diffrakterade elektroner, vilket resulterar i lägre effektivitet. Sidan av bländaren bombarderas ofta av ett stort antal elektroner, vilket lätt kan orsaka asymmetriska föroreningar och påverka bildkvaliteten. Det cirkulära målet har förbättrats i detta avseende, men nackdelen är att det är svårt att göra och det är svårt att uppnå fullständig axiell symmetri. Med tanke på de relativt avslappnade kraven på belysningssystemet kan den senare lösningen användas, vilket innebär att man lägger till en cirkulär öppning vid kondensorn för att ge ihålig belysning för provet. Effekten av denna enhet. Dess bildupplösning kan vara nära den för ljusa fältbilder, samtidigt som kontrasten förbättras avsevärt.
