Mätning av vävnadsblockvolym med hjälp av biologiska mikroskop
Hittills är kryofixering, fryst ultra-tunn snittning och frys-torkning rutinmetoder för vävnads- och cellröntgenmikroskopi-. Ange följande information om denna metod:
Ett biologiskt mikroskop med en spotlight kan flytta strålkastaren upp och ner för att uppnå måttlig ljusstyrka, och bländaren på den variabla bländaren kan också ändras för att uppnå måttlig ljusstyrka. Om ljuset kommer från solen kan strålkastaren höjas på lämpligt sätt och bländaren på det variabla ljuset kan förstoras på lämpligt sätt. Om ljuset är för starkt kan strålkastaren sänkas på lämpligt sätt och korsningens öppning kan minskas på lämpligt sätt. Om du fortfarande känner dig bländande i den här situationen kan du välja att placera ett lämpligt filter på fästet under strålkastaren. Denna ek kan uppnå en ljusstyrka som tillfredsställer dig. Naturligtvis kan justering av strålkastarens övre och nedre positioner ändra bländarstorleken på ljusavläsningen och välja lämpliga filter, vilket kräver en viss period av övning och erfarenhet.
En mycket viktig fråga inom biologisk mikroskopi är processen för provtagning och isolering av celler. Efter frys-torkning och hartsinbäddning (FD) måste de frysta ultra-tunna sektionerna bearbetas noggrant för att säkerställa att innehållet med 65 element i varje del inte skadas under observation och analys. På grund av de många stegen och de höga kostnaderna för röntgenmikroanalys är det beklagligt att dra felaktiga slutsatser om de analyserade cellerna är skadade eller döda efter långvarig och fler-bearbetning. Myokardcellerna som separeras genom gelatinasbehandling har två former, den ena är lång stavformad och den andra är cirkulär. Det senare hänvisar till döende celler som skadas under processen för cellseparation.
Innehållet och fördelningen av elektrolyter i dessa två typer av celler är mycket olika under ett biologiskt mikroskop. Na är mycket högt och K är extremt lågt i cirkulära kardiomyocyter, och koncentrationen av Ca i linjära dendriter är mycket hög. Efter verifiering med andra analytiska metoder har det bevisats att det höga Na och det låga K i cirkulära celler och det höga Ca i mitokondrier är resultatet av membranskador under cellseparation. Kallfixeringsmetoden för celler och vävnader går ofta ut på att först släcka och sedan lagra dem i flytande kväve. Släckande fixering är avgörande för konserveringseffekten. Levande celler eller färska vävnader är rika på vatten, och när de släcks blir de delar av cellerna eller vävnaderna som kommer i direkt kontakt med köldmediet (särskilt när man använder flytande kväve för kylning) ofta frysta och fixerade först, vilket bildar ett "skal" som hindrar den centrala delen av cellerna från att krossas och fixeras. Därför, när man utför röntgenmikroanalys, finner man ofta att iskristaller finns i den centrala delen av större celler. För att förhindra att denna situation inträffar används ett ämne med en smältpunkt högre än flytande kväve men lägre med 806c som köldmedium. Det finns många av dessa ämnen, men de är lätta att få tag på och det mest prisvärda är koncentrerad propan (kokpunkt 42,120c, smältpunkt 187,10c, molekylvikt 44,1), som också har en snabb kylningshastighet. Men dess nackdel är att den är brandfarlig.
