Krav för produktion av fluorescerande mikroskopprover
（1） Glasskiva
Skivans tjocklek ska vara mellan 0,8 och 1,2 mm. Om objektglaset är för tjockt absorberar det å ena sidan mer ljus, och å andra sidan kan det inte orsaka att excitationsljus samlas på provet. Objektglaset måste vara slätt, enhetligt i tjocklek och fritt från uppenbar spontan fluorescens. Ibland behövs kvartsglasglas.
（2） Täckglas
Tjockleken på täckglaset är cirka 0.17 mm, vilket är slätt och rent. För att öka excitationen kan även interferensskyddsglas användas. Detta är ett specialdesignat täckglas med flera lager av ämnen (som magnesiumfluorid) som har olika interferenseffekter på ljusets olika våglängder. Det kan tillåta fluorescens att passera jämnt, medan reflektionsexcitation kan excitera provet.
（3） Prov
Vävnadsskivor eller andra prover bör inte vara för tjocka, eftersom excitationsljuset mestadels förbrukas i den nedre delen av provet, medan den övre delen som direkt observeras av objektivlinsen inte är helt exciterad. Dessutom kan cellöverlappning eller föroreningsmaskering påverka omdömet.
（4） Tätningsmedel
Glycerin används vanligtvis som monteringsmedel, och det måste vara fritt från spontan fluorescens, färglöst och transparent. Ljusstyrkan på fluorescensen är ljusare vid pH 8,5 ~ 9,5, och det är inte lätt att blekna snabbt. Därför används vanligtvis en lika stor blandning av glycerol och 0.5mol/l karbonatbuffert vid pH 9.0-9.5 som tätningsmedel.
（5） Spegelolja
När du observerar prover med ett mörkfältsfluorescensmikroskop och ett oljemikroskop är det nödvändigt att använda linsolja. Det är bäst att använda en specialgjord icke-fluorescerande linsolja, som även kan ersättas med glycerol enligt ovan. Flytande paraffin kan också användas, men brytningsindexet är lågt och har en liten inverkan på bildkvaliteten.
Försiktighetsåtgärder för användning av ett fluorescensmikroskop
(1) Följ strikt fabrikshandbokens krav för fluorescensmikroskopet och ändra inte programmet godtyckligt.
(2) Inspektion bör utföras i ett mörkt rum. När du kommit in i mörkrummet, anslut strömförsörjningen och tänd kvicksilverlampan med ultrahögt tryck i 5 till 15 minuter. Efter att ljuskällan avger starkt ljus och stabiliseras, anpassar sig ögonen helt till mörkrummet innan de börjar observera provet.
(3) För att förhindra UV-skador på ögonen bör skyddsglasögon användas vid justering av ljuskällan.
(4) Inspektionstiden bör vara 1-2 timmar varje gång. Om den överstiger 90 minuter, minskar ljusstyrkan hos ultrahögtryckskvicksilverlampan gradvis och fluorescensen försvagas; Efter att ha exponerats för ultraviolett strålning i 3-5 minuter minskade också fluorescensen hos provet signifikant; Så det bör inte överstiga 2-3 timmar högst.
(5) Livslängden för fluorescerande mikroskopljuskällan är begränsad, och provet bör inspekteras centralt för att spara tid och skydda ljuskällan. När vädret är varmt bör en elektrisk fläkt läggas till för att avleda värme och kyla ner. Vid byte av en ny glödlampa ska användningstiden registreras från början. När lampan släcks och vill användas igen måste den vänta tills glödlampan svalnat helt innan den tänds. Undvik att tända ljuskällan flera gånger.
(6) Observera provet omedelbart efter färgning, eftersom fluorescensen minskar gradvis med tiden. Om provet förvaras i en polyetenplastpåse vid 4 grader kan det fördröja fluorescensdämpningstiden och förhindra avdunstning av monteringsmedlet.
(7) Bedömningsstandarden för fluorescensljusstyrka är generellt indelad i fyra nivåer, nämligen "en" - ingen eller synlig svag fluorescens. plus - Endast tydligt synlig fluorescens kan ses. plus plus - Synlig med ljus fluorescens. ' plus plus plus ' - Synlig och bländande fluorescens.
