Stereofluorescensmikroskop Användning och försiktighetsåtgärder
Instruktioner:
(1) Placera materialarket på scenen.
(2) Slå på spänningsstabilisatorn på fluorescensmikroskopet. Tryck sedan på startgruppen för att tända UV-lampan och stäng inte av den inom 15 minuter, och starta den inte igen inom 3 minuter efter att den stängts av.
(3) Vrid excitationsfiltret till v, färgseparationsfiltret till v och välj ett 495 eller 475 nm blockeringsfilter.
(4) Välj uvFL40, uvFL100 fluorescerande objektivmikroskop för mikroskopisk undersökning.
(5) Tillsätt icke-fluorescerande olja på objektglaset, använd först 40 x och använd sedan 100 x fokuseringsmikroskop för att kontrollera. Fluorescens uppträder.
(7) Eftersom fluorescensen hos fluorescerande ämnen gradvis försvagas med tiden när de bestrålas med ultraviolett ljus, bör synfältet ändras ofta under mikroskopisk undersökning.
(8) uvFL10 eller uvFL20 lågförstoringsmikroskop kan också användas för att inspektera material (ingen fluorescerande olja tillsätts vid användning av linser med låg effekt).
Inspelningsmetod för fluorescensbild:
Fluorescensbilden som ses av fluorescensmikroskopet har både morfologiska egenskaper och fluorescensfärg och ljusstyrka. Vid bedömning av resultaten måste de två kombineras för en omfattande bedömning. Resultaten registreras baserat på subjektiva indikatorer, det vill säga visuell observation av arbetare. Som en allmän kvalitativ observation, i grunden tillförlitlig. Med utvecklingen av teknik och vetenskap används objektiva indikatorer för att registrera bedömningsresultat i varierande grad, såsom cellspektrofotometrar, bildanalysatorer och andra instrument. Men de resultat som registreras av dessa instrument måste också kombineras med subjektiva bedömningar.
Fluorescensmikroskopfotografering är mycket nödvändigt för att spela in fluorescensbilder. Eftersom fluorescens är lätt att blekna och försvagas, är det nödvändigt att registrera resultaten i realtid. Metoden är i princip densamma som för vanlig fotomikrografi. Behöver bara använda höghastighets ljuskänslig film som ASA200 eller högre eller 24. ovan. Eftersom ultraviolett ljus har en stark effekt på fluorescenssläckning, såsom FITC-markörer, kommer fluorescensljusstyrkan att minska med 50 procent när den bestrålas med ultraviolett ljus i 30s. Därför, om exponeringshastigheten är för låg, kan den fluorescerande bilden inte tas. Fluorescensmikroskop för allmän forskning har halvautomatiska eller helautomatiska fotomikrografisystemanordningar.
Försiktighetsåtgärder:
(1) Arbeta strikt i enlighet med kraven i fluorescensmikroskopets fabriksinstruktioner, och ändra inte programmet efter behag.
(2) Inspektion bör utföras i ett mörkt rum. När du har gått in i mörkrummet ansluter du strömförsörjningen och tänder kvicksilverlampan med ultrahögt tryck i 5-15 minuter. Efter att det starka ljuset från ljuskällan är stabilt är ögonen helt anpassade till mörkrummet och börjar sedan observera provet.
(3) För att förhindra att ultravioletta strålar skadar ögonen, bör skyddsglasögon användas vid justering av ljuskällan.
(4) Inspektionstiden är helst 1-2 timmar varje gång. Om den överstiger 90 minuter kommer ljusintensiteten hos ultrahögtryckskvicksilverlampan gradvis att minska och fluorescensen försvagas; efter att provet har bestrålats med ultravioletta strålar i 3-5 minuter kommer fluorescensen också att försvagas avsevärt; därför bör det inte överstiga 2-2 timmar högst. 3h.
(5) Livslängden för ljuskällan i fluorescensmikroskopet är begränsad, och proverna bör inspekteras kollektivt för att spara tid och skydda ljuskällan. När vädret är varmt bör fläktar läggas till för att avleda värmen, och de nya glödlamporna bör registreras från början av deras användningstid. När du vill använda den igen efter att lampan har släckts måste du vänta tills glödlampan är tillräckligt kyld innan du tänder den. Undvik att tända ljuskällan flera gånger om dagen.
(6) Observera provet omedelbart efter färgning, eftersom fluorescensen gradvis försvagas med tiden. Om provet förvaras i en polyetenplastpåse vid 4 grader kan fluorescensförsvagningstiden försenas och monteringsmedlet kan förhindras från att avdunsta.
(7) Bedömningsstandard för fluorescensljusstyrka: den är i allmänhet uppdelad i fyra nivåer, det vill säga "en" - ingen eller svag fluorescens kan ses. " plus "—Endast tydligt synlig fluorescens kan ses. " plus plus "—Synlig och ljus
