Grunderna och de strukturella elementen i ett fluorescensmikroskop
Fluorescensmikroskopi använder en punkt med hög ljuseffektivitet för att avge ljus med en viss våglängd (som ultraviolett ljus 3650 tum eller lila blått ljus 4200 tum) genom filtersystemet som excitationsljus för att excitera de fluorescerande ämnena i provet för att avge fluorescens av olika färger Efter det, observera genom förstoringen av objektivlinsen och okularet. På så sätt, under stark kontrastbakgrund, även om fluorescensen är mycket svag, är den lätt att identifiera och har hög känslighet. Det används främst för forskning av cellstruktur och funktion och kemisk sammansättning. Grundstrukturen för ett fluorescensmikroskop är sammansatt av ett vanligt optiskt mikroskop plus några tillbehör (som en fluorescerande ljuskälla, ett excitationsfilter, en tvåfärgad stråldelare och ett blockerande filter, etc.). Fluorescerande ljuskälla – använd vanligen ultrahögtryckskvicksilverlampa (50-200W), som kan avge ljus med olika våglängder, men varje fluorescerande ämne har en excitationsvåglängd som producerar den starkaste fluorescensen, så ett excitationsfilter ( Generellt, det finns ultravioletta, lila, blåa och gröna excitationsfilter), som endast tillåter excitationsljus av en viss våglängd att passera genom och bestråla provet, samtidigt som det absorberar annat ljus. Efter att varje ämne har bestrålats med excitationsljus avger det synlig fluorescens med en längre våglängd än bestrålningsvåglängden på mycket kort tid. Fluorescens är specifik och generellt svagare än excitationsljus. För att observera specifik fluorescens måste blockering (eller undertryckning) läggas till bakom objektivlinsen och användas tillsammans med den.
Skillnaden mellan fluorescensmikroskop och vanligt mikroskop
1. Belysningsmetoden är vanligtvis episkopisk, det vill säga ljuskällan projiceras på provet genom objektivlinsen;
2. Ljuskällan är ultraviolett ljus, våglängden är kortare och upplösningen är högre än för vanliga mikroskop;
3. Det finns två speciella filter, det ena framför ljuskällan används för att filtrera bort synligt ljus, och det mellan okularet och objektivlinsen används för att filtrera bort ultravioletta strålar för att skydda det mänskliga ögat.
Fluorescensmikroskop är också ett slags optiskt mikroskop, den största skillnaden är att excitationsvåglängden för de två är olika. Detta bestämmer skillnaden mellan fluorescensmikroskopet och det vanliga optiska mikroskopet vad gäller struktur och användning.
Fluorescensmikroskopi är ett viktigt verktyg i immunfluorescerande cytokemi. Den är sammansatt av huvudkomponenter som ljuskälla, filterplattesystem och optiskt system. Det är att använda en viss våglängd av ljus för att excitera provet för att avge fluorescens, och att observera fluorescensbilden av provet genom att förstärka objektivlinsen och okularsystemet.
