Det finns två typer av fluorescensmikroskop baserat på deras ljusvägar:
1. Transmissionsfluorescensmikroskop: Excitationsljuskällan används för att excitera fluorescens genom att passera genom provmaterialet genom en kondensorlins. Vanligt använda mörkfältskoncentratorer kan också användas, och vanliga koncentratorer kan användas för att justera reflektorn för att omdirigera och sidolobar excitationsljuset till provet. Detta är ett relativt gammaldags fluorescensmikroskop. Dess fördel är stark fluorescens vid låg förstoring, men dess nackdel är att dess fluorescens minskar med ökande förstoring. Därför är det bättre att observera större provmaterial.
2. Fallande ljus fluorescensmikroskop är en ny typ av fluorescensmikroskop som utvecklats i modern tid. Till skillnad från ovanstående faller excitationsljuset från objektivlinsen nedåt på provets yta, med samma objektivlins som belysningskondensorn och objektivlinsen för att samla fluorescens. En dubbelfärgad stråldelare måste läggas till den optiska vägen, som är 45 grader från det lätta uranet. Vinkel, excitationsljuset reflekteras in i objektivlinsen och fokuseras på provet. Fluorescensen som genereras av provet, såväl som excitationsljuset som reflekteras från ytan av objektivlinsen och täckglaset, går in i objektivlinsen och återgår till stråldelaren med två färger, vilket separerar excitationsljuset och fluorescensen. Det kvarvarande excitationsljuset absorberas sedan av blockeringsfiltret. Om olika kombinationer av excitationsfilter/dubbelfärgade strålseparatorer/blockerande filter används kan de tillgodose behoven hos olika fluorescerande reaktionsprodukter. Fördelarna med detta fluorescensmikroskop är enhetlig fältbelysning, tydlig avbildning och starkare fluorescens med större förstoring.
Instruktioner för användning av fluorescensmikroskop
1. Slå på ljuskällan. Kvicksilverlampan med ultrahögt tryck måste förvärmas i några minuter för att nå maximal ljusstyrka.
2. Transmissionsfluorescensmikroskopi kräver installation av det nödvändiga excitationsfiltret mellan lampkällan och kondensorn, och motsvarande blockeringsfilter bakom objektivlinsen. Det fallande ljusfluorescensmikroskopet måste sätta in det erforderliga excitationsfiltret/dubbelfärgade stråldelaren/blockerande filterblocket i spåret på den optiska banan.
3. Observera med ett lågeffektmikroskop och justera ljuskällans mitt i enlighet med justeringsanordningen för olika typer av fluorescensmikroskop, så att den är placerad i mitten av hela belysningspunkten.
4. Placera provet och fokusera det för observation. Uppmärksamhet bör iakttas under användning: Titta inte direkt med ögonen innan du installerar filtret för att undvika ögonskador; Vid observation av prover med ett oljemikroskop måste ett speciellt icke-fluorescerande oljemikroskop användas; Efter att högtryckskvicksilverlampan har stängts av kan den inte omedelbart tändas igen. Det tar 5 minuter att starta om, annars blir det instabilt och påverkar kvicksilverlampans livslängd.
(3) När man observerar under ett fluorescensmikroskop på en undervisningsplattform med ett filter för blått violett ljus kan celler färgas med 0.01 % akridin orange fluorescerande färgämne ses. Kärnan och cytoplasman är exciterade för att producera två olika färger av fluorescens (mörkgrön och orangeröd).
