Vilka är provkraven för ljusmikroskopi?
I provberedningsprocessen för det optiska mikroskopet är tjockleken på skivan av provet mellan 2 och 25 um; tjockleken på skivan i elektronmikroskopet är inom 50-100nm (förutom högspänningselektronmikroskopet kan tjockleken på provet nå 1um), så skivningsmetoden som används är inte densamma.
När det gäller bäraren är bäraren för den optiska mikroskopsektionen ett objektglas, och bäraren för elektronmikroskopsektionen är bärargallret.
När det gäller fixering fixeras optiska mikroskopsektioner med ett sammansatt fixativ, medan elektronmikroskopsektioner fixeras upprepade gånger med ett enda fixativ
När det gäller färgning är färgningen av optiska prov relativt enkel. Enligt olika observationsprover och typen av optiskt mikroskop räcker det oftast med att använda några fixerade fläckar. Det finns många metoder för att färga om elektronmikroskopprover, och de är också mycket komplicerade, som negativ färgning, silverfärgning och så vidare.
När det gäller inbäddning används paraffin, kollodium, gelatin etc. som inbäddningsmedel för optiska mikroskopsektioner; epoxiharts, polystyrenharts, isobutylenharts och vattenlösligt harts används som inbäddningsmedel för elektronmikroskopsektioner.
För att få mikroskopets synfält att få enhetlig och tillräcklig belysning, är det nödvändigt att justera det optiska vägsystemet för belysning när mikroskopet först installeras och felsöks. krav. Att korrekt greppa justeringen av det optiska vägsystemet för belysning är dessutom ett nödvändigt steg efter att ha bytt ut glödlampan i processen att använda mikroskopet, och det är också ett nödvändigt sätt att testa mikroskopets prestanda då och då i daglig användning. Justeringen av mikroskopbelysningens optiska vägsystem innefattar huvudsakligen följande 4 punkter: 1. Preliminär justering av ljuskällans lampkammare utanför mikroskopet ① Öppna först lampkammarens skal och sätt in halogenlampan i sockeln genom att trycka på fjäderklämman. Smuts som fingeravtryck på glödlampan kommer att påverka glödlampans livslängd. ②Placera lamprummet på bordet, efter att ha slagit på strömmen, använd en speciell skruvmejsel för att justera lampans fokuseringsknapphål (markerat med "←→"), så att glödtråden projiceras på väggen 1-2 m bort och filamentbilden justeras. Justera sedan höjden på lampan för att justera glödtrådshålet (markerat med "──") för att göra glödtrådens position lämplig; justera sedan skruvhålen för vänster och höger läge på lampan (markerade med "──") för att göra den vänstra och högra positionen för glödtråden lämplig .
2. Syftet med inspektionen och korrigeringen av ljuskällans (glödtrådens) läge i mikroskopet är att justera bildänden på belysningsinstrumentet till objektivlinsens synfält och att säkerställa att synfältet av mikroskopet tas emot fullständigt och enhetligt ur ljuskällans perspektiv. Belysning, som är en förutsättning för justering av Kühlers belysningssystem. Grundläggande verktyg som krävs: Centreringsteleskop är utrustade med mikroskopköp. ① Koppla ur den frostade glashylsan i lamphuset och sätt tillbaka lamphuset på mikroskopet ② Välj en 10× objektivlins, slå på ljuskällans program för att hitta provet och justera fokus tydligt och använd sedan ett 40× objektiv lins för att fokusera provet tydligt (40× objektivlins Hela bilden av glödtråden kan ses tydligt); ③ Öppna både öppningsmembranet och fältmembranet på kondensorn maximalt; ④ Koppla ur ett av okularen, ersätt det med ett centrerande teleskop, ta tag i den vita delen och förläng det svarta okularet med den andra handen. Filamentbilden kan ses i synfältet; ⑤Om filamentpositionen inte är lämplig, justera "──"-hålet, justera filamentbilden i horisontell riktning, justera "──"-hålet och justera glödtrådsbilden i vertikal riktning tills Justera filamentbilden till en cirkulär bild som bara fyller objektivets bländare; ⑥ Efter justeringen, sätt tillbaka den frostade glashylsan till sitt ursprungliga läge, koppla ur centreringsteleskopet och sätt tillbaka okularet för nästa justering. Ovannämnda justering av belysningsljuskällans lamprum utanför mikroskopet och kalibreringen av ljuskällans belysningsinstruments position inuti mikroskopet behöver endast utföras när mikroskopet är installerat och felsökt för första gången och glödlampan är ersatt. I händelse av förvirring kan du återställa det till det ursprungliga tillståndet enligt ovanstående steg.
3. Korrekt justering av Kohlers belysningssystem (Kohler) Korrekt justering av mikroskopet, en av huvuduppgifterna är justeringen av belysningsljusbanan, och nyckeln är justeringen av Kohlers belysningssystem. För alla som använder mikroskop, särskilt de som tar mikroskop, bör de ha en viss förståelse och behärskning av principerna för Kühlers belysningssystem och dess inställningssteg, så att de kan ge fullt spel åt mikroskopets funktioner. De resulterande fotona kan bli mer konsekventa och perfekta i effekt. Principen för Kühlers belysningssystem är helt enkelt: ljuset som sänds ut av någon punkt på ljuskällans belysningsinstrument kan belysa synfältet för mikroskopet, och ljuset som sänds ut av varje punkt på ljuskällans belysningsinstrument samlas in, och det är i mikroskopets synfält. En mycket tillräcklig och enhetlig belysning uppnås. Syftet med att justera Kuhlers belysningssystem är att få enhetlig och tillräcklig belysning för det observerade synfältet och att förhindra att ströljus påverkar eller stör bildsystemet, för att undvika att det bildas dimma på negativet under fotografering. Viktiga komponenter i ett högjusterat Kühler-belysningssystem: fältbländare, kondensorsystem med axeljustering. ① Välj 10× objektivlins och 10× okular ② Placera kondensorns främre lins i den optiska banan, justera bländaren till ett måttligt läge (inte för stort eller inte för litet), höj sedan kondensorn till det översta läget och justera kondensorns vridskiva till läge "J" för ljusfält ③ Justera fältmembranet till minimum (0,1)
④ Sätt det förseglade biologiska provet på scenen, slå på ljuskällan och fokusera tydligt
⑤ Ett lokalt upplyst område eller ljus punkt kommer att dyka upp i synfältet, vilket är en suddig bild av fältbländaren, där detaljerna i provet kan ses tydligt; Se detaljerna i provet tydligt
⑥ Sänk kondensorn något så att den ljusa fläcken i synfältet gradvis smalnar av och gradvis blir en tydlig polygonal bild, vilket är den tydliga bilden av fältbländaren;
⑦ Under normala omständigheter är den polygonala bilden inte i mitten av synfältet. Det är nödvändigt att justera ett par centreringsskruvar för kondensorn för att justera den polygonala bilden av synfältet till mittläget;
⑧ Öppna gradvis synfältsbländaren för att få den polygonala bilden att bli en inskriven polygon i synfältet och kontrollera ytterligare inriktningstillståndet. Om inriktningen inte är idealisk, fortsätt att justera inriktningsskruven något;
⑨ Öppna fältbländaren något för att få den polygonala bilden att försvinna på kanten av synfältet. Vid denna tidpunkt är justeringen av Kühlers belysningssystem klar. Efter att Kühlers belysningssystem justerats belystes hela synfältet jämnt och mikrofotografierna var ljusa och tydliga med normal kontrast.
