Vilken typ av mikroskop används för att se formen på mikrobiella celler
En samlingsbeteckning för alla små organismer som är svåra för individer att observera med blotta ögat. Mikroorganismer inkluderar bakterier, virus, svampar och några få alger. (En del mikroorganismer är dock synliga för blotta ögat, som svampar som tillhör svampar, Ganoderma lucidum etc.) Virus är en typ av "icke-cellulära organismer" som består av ett fåtal komponenter som nukleinsyror och proteiner, men deras överlevnad måste bero på levande celler. Beroende på de olika miljöer som finns kan de delas in i prokaryota mikroorganismer, rymdmikroorganismer, svampmikroorganismer, jästmikroorganismer, marina mikroorganismer m.m.
Mikroorganismers roll och skada:
En av de viktigaste effekterna av mikroorganismer på människor är förekomsten av infektionssjukdomar. 50 procent av mänskliga sjukdomar orsakas av virus. Historien om mikrober som orsakar mänskliga sjukdomar är historien om människors ständiga kamp med dem. Människan har gjort stora framsteg när det gäller att förebygga och behandla sjukdomar, men nya och återkommande mikrobiella infektioner fortsätter att förekomma, såsom ett stort antal virussjukdomar som saknar effektiva terapeutiska läkemedel. Den patogena mekanismen för vissa sjukdomar är inte klar. Missbruket av ett stort antal bredspektrumantibiotika har orsakat ett starkt selektionstryck, vilket fått många stammar att mutera, vilket leder till uppkomsten av läkemedelsresistens och människors hälsa hotas av nya hot. Vissa segmenterade virus kan mutera genom rekombination eller omsortiment. Det mest typiska exemplet är influensavirus.
Efter att ha känt till den specifika definitionen av mikroorganismer, vilken typ av mikroskop ska försöksledaren använda när han studerar mikroorganismer för att se, och vilket mikroskop som kan användas för att se bättre och för att observera och analysera vanliga mikrobiella former.
Uppfinningen av mikroskopet är att kunna se leende föremål som inte kan ses med blotta ögat. Storleken på mikroorganismer är mycket liten, så de måste förstoras och observeras med hjälp av ett mikroskop. Dessutom finns det många typer av mikroorganismer, så i princip de flesta optiska mikroskop kan För att observera mikroorganismer är nästa fråga vilken typ av mikroskop som ska användas för observation och analys av mikroorganismer. Vanliga mikroskop för observation av mikrobiell morfologi inkluderar biologiska mikroskop, faskontrastmikroskop, inverterade mikroskop, fluorescensmikroskop och konfokalmikroskop. Mikroskop och så vidare.
Följande beskriver de olika mikroskop som används för att observera mikroorganismer:
1. Vanligt ljusmikroskop
Naturligt ljus eller ljus används som ljuskälla, och dess våglängd är cirka {{0}}.4 μm. Mikroskopets upplösning är hälften av våglängden, det vill säga 0,2 μm, och den minsta bilden som är synlig för blotta ögat är 0,2 mm. Om du använder en oljespegel (immersionsspegel) för att förstora 1000 gånger kan därför partiklarna på 0,2 μm förstoras till 0,2 mm synliga för blotta ögat. Vanliga optiska mikroskop kan användas för observation av bakterier, aktinomyceter och svampar.
2. Mörkfältsmikroskopi används vanligtvis för att observera ofärgade mikrobiell morfologi och rörelse. Efter att mörkfältskondensorn har installerats i det vanliga mikroskopet kan ljuset inte tränga in direkt från mitten och synfältet är mörkt. När provet får snett ljus från kondensorns kant kan det spridas, så ljusa mikroorganismer kan observeras i den mörka fältbakgrunden som bakterier eller spiroketer.
3. Faskontrastmikroskop Faskontrastmikroskop använder ljuseffekten från fasskillnadsplattan för att ändra ljusfasen och amplituden för direkt ljus och omvandla skillnaden mellan ljusfas till skillnad i ljusintensitet. Under ett faskontrastmikroskop, när ljus passerar genom ett ofärgat prov, orsakas skillnaden i ljusfas av inkonsekvensen i densiteten hos olika delar av provet, och morfologin, inre strukturen och rörelsesättet hos mikroorganismer kan observeras.
4. Fluorescensmikroskop Fluorescensmikroskop är i princip detsamma som vanligt optiskt mikroskop, den största skillnaden är ljuskällan, filtret och kondensorn. För närvarande använder de flesta av dem epi-ljusanordningar, och högtryckskvicksilverlampor används vanligtvis som ljuskällor, som kan avge ultraviolett eller blåviolett ljus. Det finns två sorters filter: excitationsfilter och absorptionsfilter. Förutom allmänna ljusfältskondensatorer kan mörkfältskondensatorer också användas i fluorescensmikroskop som använder blått ljus för att förbättra kontrasten mellan fluorescens och bakgrund. Denna metod är tillämpbar för detektion eller identifiering av bakterier färgade med fluorescerande pigment eller kombinerade med fluorescerande antikroppar.
5. Elektronmikroskop använder elektronflöde som ljuskälla. Jämfört med synligt ljus är våglängden tiotusentals gånger olika, vilket avsevärt förbättrar upplösningen. Den magnetiska spolen används som det optiska förstärkningssystemet, och förstoringen kan nå tiotusentals eller hundratusentals gånger. Det används ofta i viruspartiklar. och observation av bakteriell ultrastruktur.
Observation av ofärgade mikrobiella prover:
Ofärgade prover kan i allmänhet användas för att observera bakteriell morfologi, kraft och rörelse. Bakterier är färglösa och genomskinliga när de är ofärgade och observeras i mikroskop främst av skillnaden mellan bakteriernas brytningsindex och den omgivande miljön. Bakterier med flageller rör sig kraftigt, medan bakterier utan flageller visar oregelbundna Brownska rörelser. Livskraftiga bakterier som Treponema pallidum, Leptospira och Campylobacter har distinkta former och rörelsemönster, som är av diagnostisk betydelse. Vanliga metoder är tryckfallsmetod, hängande droppmetod och kapillärmetod.
1. Metod med hängande droppar Applicera vaselin runt det konkava hålet på den rena konkava glasskivan, ta en ring av bakteriesuspension med en inokuleringsögla och placera den i mitten av täckglaset, rikta sedan in det konkava hålet på den konkava glasskivan med droppen i mitten av täckglaset och sätt på locket, vänd det sedan snabbt, tryck lätt på täckglaset så att det fäster tätt mot vaselinet på kanten av det konkava hålet, och observera sedan under en hög effekt mikroskop (eller mörkt fält).
2. Ta en ring av bakteriesuspension med en inokuleringsögla och placera den i mitten av en ren glasskiva med tryckfallsmetod, och täck försiktigt över bakteriesuspensionen med ett täckglas, var noga med att undvika generering av luftbubblor och förhindra bakteriesuspensionen från att svämma över. Ljusfältsobservation (eller mörkfältsobservation) under en högeffektslins.
3. Kapillärmetoden används främst för undersökning av kinetiken hos anaeroba bakterier. Välj vanligtvis 60~70mm lång. Efter att ha sugit in den anaeroba bakteriesuspensionen genom en kapillär med en öppning på 0,5-1,0 mm, försegla de två ändarna av kapillären med en låga. Kapillären fixerades på objektglaset med plastpapper och observerades under en högeffektslins i mörkt fält.
Observation av färgade mikrobiella prover med mikroskop:
Efter att bakterieprovet har färgats, på grund av den skarpa kontrasten i färg mellan bakterierna och den omgivande miljön, kan bakteriernas morfologiska egenskaper (såsom storlek, form, arrangemang, etc.) hos bakterierna och vissa speciella strukturer vara tydligt observeras under ett vanligt optiskt mikroskop (såsom kapslar, flageller, sporer etc.), och bakterierna kan klassificeras och identifieras enligt färgningsreaktiviteten.
(1) Allmänt förfarande för bakteriell färgning Det allmänna förfarandet för bakteriell färgning är: utstryk (torkning) – fixering – färgning.
1. Smörjberedning av blod, sekret, utsöndringar, punkteringsvätska och vätskekultur, och rikta tunnfilmsutstryk på objektglas; obduktion eller infekterade djurvävnader, smeta ut lesionen med en bomullspinne för provtagning. För beredning av bakteriekolonier eller gräsmattor på fast medium, använd först en inokuleringsögla för att ta en ring med normal saltlösning och placera den i mitten av objektglaset, använd sedan en steril ympslinga för att ta en liten mängd kultur och mala den jämnt i vanlig koksaltlösning, och sprid ut den på 1 cm2 Stora eller små målade ytor, låt den torka naturligt i rumstemperatur eller torka långsamt på avstånd.
2. Syftet med fixering är att döda bakterier, koagulera bakteriellt protein och struktur och underlätta färgning; främja bakterier att fästa vid objektglaset för att undvika att sköljas bort av vatten under tvättning; ändra permeabiliteten av bakterier till färgämnen, vilket är fördelaktigt för strukturen av bakterieceller av färgning. Det fixeras vanligtvis genom uppvärmning med en låga, och det torkade smeten passerar snabbt genom lågan i 3 gånger. Det är bättre att inte bränna huden på baksidan av handen när den rör vid bilden.
3. Färgning Enligt olika inspektionsändamål, välj olika färgningsmetoder för färgning. Vid färgning, tillsätt färglösningen droppvis för att öka täckningen.
4. Betning Vilket ämne som helst som kan förstärka affiniteten mellan färgämnet och det färgade föremålet, fixera färgämnet på det färgade föremålet och orsaka en förändring av cellmembranets permeabilitet kallas betningsmedel. Vanligtvis används alun, garvsyra, metallsalter och jod, etc., och upphettning används också för att främja färgning. Betningsmedel kan användas mellan primärfärgning och motfärgning, och kan även användas efter fixering eller ingå i fixering och färgning.
5. Avfärgning Varje kemiskt medel som kan ta bort färgen på det färgade föremålet kallas avfärgningsmedel. Etanol, aceton, etc. används vanligtvis som avfärgningsmedel. Avfärgningsmedlet kan detektera graden av stabilitet hos kombinationen av bakterier och färgämnen, som kan användas för differentiell färgning.
6. Motfärgning Bakterier eller deras strukturer som har avfärgats motfärgas ofta med en motfärgningslösning för enkel observation. Färgen på motfärgningslösningen skiljer sig från den på den primära färgningslösningen för att bilda en skarp kontrast. Motfärgningen bör inte vara för stark för att inte täcka över färgen på den initiala färgningen.
