Varför behöver du använda ett konfokalmikroskop?
1. Optiska mikroskop har nått ett tillstånd av perfektion genom ansträngningar och förbättringar av våra stora föregångare. Faktum är att vanliga mikroskop kan ge oss vackra mikroskopiska bilder enkelt och snabbt. Men en händelse inträffade som förde revolutionerande innovation till denna nästan perfekta värld av mikroskopi. Detta var uppfinningen av "laserskanningskonfokalmikroskopet." Kännetecknande för denna nya typ av mikroskop är att den använder ett optiskt system som extraherar bildinformation endast på ytan där fokus är fokuserat, och återställer den erhållna informationen i bildminnet samtidigt som fokus ändras, och därigenom erhåller fullständig 3D-information. En levande bild av intelligens. Genom denna metod kan information om ytformen som inte kan bekräftas med ett vanligt mikroskop lätt erhållas. Dessutom, för vanliga optiska mikroskop, är "ökande upplösning" och "fördjupning av fokusdjupet" motstridiga förhållanden, särskilt vid höga förstoringar. Men i konfokalmikroskopi är detta problem lätt att lösa.
2. Fördelar med konfokala optiska system
Det konfokala optiska systemet utför punktbelysning på provet, och det reflekterade ljuset använder också en punktreceptor för att ta emot ljuset. När provet placeras i fokuspositionen kan nästan allt reflekterat ljus nå fotoreceptorn. När provet är ur fokus kan det reflekterade ljuset inte nå fotoreceptorn. Med andra ord, i det konfokala optiska systemet kommer endast bilden som sammanfaller med fokus att matas ut, och ljusfläckarna och det värdelösa spridda ljuset kommer att avskärmas.
3. Varför använda laser?
I det konfokala optiska systemet belyses provet vid en punkt, och det reflekterade ljuset tas också emot med hjälp av en punktfotoreceptor. Därför blir punktljuskällor nödvändiga. Lasrar är mycket punktljuskällor. I de flesta fall använder ljuskällan i konfokalmikroskop laserljuskällor. Dessutom är egenskaperna hos laser som monokromaticitet, riktningsförmåga och utmärkt strålform också viktiga skäl för dess utbredda användning.
4. Observation i realtid baserad på höghastighetsskanning blir möjlig
För laserskanning används en akustisk optisk deflektor (AO-element) i horisontell riktning och en servoelektriskt styrd strålavsökningsspegel (Servo Galvano-spegel) i vertikal riktning. Eftersom den akustiskt-optiska avböjningsenheten inte har en mekanisk vibrationsdel kan den skanna med hög hastighet, vilket möjliggör realtidsobservation på övervakningsskärmen. Den höga hastigheten för denna typ av bildbehandling är ett mycket viktigt objekt som direkt påverkar hastigheten för fokusering och positionsinhämtning.
5. Förhållandet mellan fokusposition och ljusstyrka
I det konfokala optiska systemet är ljusstyrkan maximal när provet är korrekt placerat i fokuspositionen, och dess ljusstyrka kommer att minska kraftigt framför och bakom det (heldragen linje i figur 4). Denna känsliga selektivitet hos fokalplanet är också principen bakom höjdriktningsbestämningen och fokusdjupexpansionen hos det konfokala mikroskopet. Däremot har ett normalt optiskt mikroskop inga tydliga ljusstyrkaförändringar före och efter fokuspositionen (prickad linje i figur 4).
6. Hög kontrast och hög upplösning
I vanliga optiska mikroskop kommer det reflekterade ljuset från den oskärpa delen att störa och överlappa fokusavbildningsdelen, vilket resulterar i en minskning av bildkontrasten. Däremot, i det konfokala optiska systemet, avlägsnas ströljus utanför fokus och ströljus inuti objektivlinsen nästan helt, så en bild med mycket hög kontrast kan erhållas. Dessutom, eftersom ljuset passerar genom objektivlinsen två gånger, skärps punktbilden, vilket också förbättrar mikroskopets upplösningsförmåga.
